Аналіз на вірус Епштейн-Барра

1. сутність інфекції
2. Принцип проведення аналізу
3. Антитіла на вірус Епштейна-Барр
4. Проведення аналізів на основі ІФА
5. розшифровка результатів
6. Аналіз із застосуванням методу ПЛР

Аналіз на вірус Епштейна-Барр є важливим елементом діагностики, особливо враховую велику поширеність такої інфекції по всьому світу. Статистика стверджує, що до 90% всього населення Землі в тій чи іншій формі піддавалися впливу цього збудника, а велика частина людей після спілкування з цим вірусом стає довічним його носієм і джерелом інфекції.

Така поширеність інфекції іноді вводить людину в оману, і він вважає непотрібним аналіз на вірус Епштейна-Барр. Однак таке твердження не так. Ці аналізи просто необхідні при плануванні вагітності, щоб захистити майбутньої дитини, вони потрібні всім, у кого є підозра на зараження, для виявлення ряду інфекційних уражень і запобігання небажаних наслідків для здоров'я.

сутність інфекції

Вірус Епштейна-Барр (ВЕБ) є різновидом герпесвірусу, а саме вірус герпесу людини IV типу. При зараженні збудник потрапляє в епітелій ротоглотки і слинної залози, провокуючи активну інфекцію, що виражається в наявності вірусу в слині. Далі він поширюється на епітелій носоглотки і вражає В-лімфоцити, не зачіпаючи Т-лімфоцити крові. При впливі вірусу лімфоцити здатні трансформуватися з появою клонів у вигляді атипових лімфоцитів. Потрапляючи в організм, ВЕБ провокує відповідь імунної системи як гуморального, так і клітинного типу.

Вірус володіє чотирма основними антигенами: ранній (з'являється в ядрі і цитоплазмі), капсидний (присутній в нуклеокапсид), мембранний і ядерний (містить поліпептиди) типи. Виявлено 2 характерних штаму - А і В. У період тривалого існування ВЕБ може перебувати в хронічній (найбільшого поширення), повільно розвивається і латентній формі; хронічна форма періодично рецидивує гострою фазою.

Прийнято вважати, що вірус Епштейна-Барр може спровокувати такі хвороби:

• синдром хронічної втоми;
• мононуклеоз (в т.ч. аденоз, залозиста лихоманка, хвороба Філатова);
• хвороба Ходжкіна;
• лімфома Беркітта;
• карцинома носоглотки;
• синдром Стівенса-Джонсона;
• гепатит;
• герпес;
• герпангіна;
• розсіяний склероз;
• лейкоплакия;
• хвороба Кікучі.

Найбільш часто прояв у вигляді гострої форми інфекційного мононуклеозу.

Принцип проведення аналізу

Визначення змісту ВЕБ зазвичай проводиться на основі імуноферментного аналізу (ІФА). Принцип такого дослідження заснований на тому, що на будь-який антиген патогенного збудника імунна система виробляє імуноглобулін (антитіло) для блокування і нейтралізації чужорідної клітини. При першому знайомстві з інфекцією виробляється антитіло групи М (lgM), а для протидії укоріненому вірусу - антитіла класу G (lgG).

Аналіз крові або слини здатний виявити імуноглобуліни обох типів, а по їх рівню провести оцінку наявності в організмі інфекції. Розшифровка аналізу базується на тому, що позитивним результатом визнається високий рівень їх змісту (в організмі є інфекція), а негативний результат - істотно знижений їх кількість, що вказує на відсутність необхідності вироблення антитіл.

Антитіла на вірус Епштейна-Барр

З урахуванням наявності 4 антигенів ВЕБ слід очікувати утворення відповідних антитіл, їх зміст характерно для різного ураження цим збудником. Імуноглобулін lgM до антигену капсидних типу (VCA) виробляється активно при гострій фазі ВЕБ-інфекції. Його зміст швидко зростає в початковий період інфікування і практично зникає після 30-40 днів хвороби, але проявляється знову при рецидивах. Антитіла lgG приходять на зміну lgM і можуть залишитися на все життя, навіть після повного одужання, а при черговому загостренні або повторному інфікуванні їх кількість зростає.

До інших антигенів виробляються в основному антитіла типу lgG. Імуноглобуліни до антигену раннього типу (ЕА) виробляються на початковій стадії гострої фази. Вони проявляються вже через кілька днів після зараження, а зникають через 4-6 місяців.

Антитіла lgG до антигену ядерного типу (ЕBNA) досягають визначна рівня через 4-5 місяців після інфікування, навіть якщо захворювання протікає безсимптомно.

В основному вони зберігаються в організмі дуже тривалий термін, тому можуть виявлятися майже у 90% дорослих людей. При активізації хвороби спостерігається зростання рівня lgG EBNA. Їх підвищений фон може вказувати на хронічну форму розвитку захворювання.

Проведення аналізів на основі ІФА

Визначення наявності антитіл проводиться на пробах венозної крові і слини. При відсутності інфекції антитіла не виявляються. У гострій формі захворювання виявляється lgM VCA; можуть бути присутніми lgG VCA і lgG EA; lgG EBNA відсутня. При гострій фазі хронічної форми хвороби можуть бути присутніми lgM VCA і lgG VCA; обов'язково виявляються lgG EA і lgG EBNA. У атиповим перебігом хронічної форми lgM VCA відсутня, можлива наявність lgG VCA, містяться lgG EA і lgG EBNA.

У випадках коли збудник знаходиться в латентному стані, lgM VCA і lgG VCA відсутні, а відзначаються lgG EA і lgG EBNA. У стані одужання після медикаментозного лікування присутній тільки lgG EBNA. У фазі реактивації при хронічній формі хвороби виявляються всі види імуноглобулінів. При наявності злоякісних утворень, причиною яких стає ВЕБ, аналіз крові дає наступний результат: відсутність lgM VCA і мала ймовірність наявності lgG EBNA, але значно завищений рівень lgG VCA і lgG EA.

розшифровка результатів

Позитивний результат, тобто наявність інфекції, може бути викликаний наступними причинами: гостра форма мононуклеозу; активна фаза хронічної форми інфекції; пухлинні утворення; пройшла інфекція протягом до півроку після одужання. Хибнопозитивний результат може бути отриманий при порушенні підготовчого періоду або неправильному взяття проби. На результат аналізу можуть вплинути гемоліз взятої проби, підвищена концентрація ліпідів, бактеріальне забруднення посуду, в якій знаходиться проба. Хибнопозитивна оцінка може виникнути при таких захворюваннях: токсоплазмоз, цитомегаловірусна зараження, герпес іншого типу, імунодефіцит.

Негативний результат, тобто відсутність усіх маркерів, може бути зафіксований в наступних випадках: відсутність ВЕБ; незавершений інкубаційний період інфікування; закінчення хвороби (після 6 місяців після реального закінчення хвороби); латентний стан збудників (людина є тільки переносником вірусу). При виникненні сумнівів щодо результатів аналізу дослідження необхідно повторити через 12-14 днів.

Аналіз із застосуванням методу ПЛР

Використання аналізу на ВЕБ із застосуванням методу ІФА часто не може дати точного діагнозу, що вимагає додаткових уточнюючих досліджень. Високу точність діагностики дає аналіз, заснований на методі полімерної ланцюгової реакції (ПЛР) з виявленням вірусної ДНК. На дослідження береться проба крові, сечі, мокротиння, слини, навколоплідних вод у вагітних жінок.

Найчастіше дослідження проводяться на венозної крові. Метод ПЛР є доповненням до аналізів із застосуванням ІФА у випадках, коли цей аналіз не дає однозначного трактування результатів. Ефективне застосування ПЛР при аналізі крові тільки при гострих формах хвороби і фазах загострення. При хронічних формах і для оцінки правильності лікування цей аналіз крові не використовується. Особливо рекомендується застосування подібних досліджень для новонароджених. Більшої інформативністю за визначенням ДНК вірусу в хронічних і атипових формах має аналіз проб слини.

http:

Крім проб крові і слини вірус Епштейн-Барра може виявлятися додатково по випотіванню, зішкріб клітин епітелію носової слизової оболонки, зішкріб епітелію ротоглотки, спинномозкової рідини, еякуляту, зішкріб епітеліальних клітин урогенітального каналу.