Наукова Мережа >> Вплив типів вірусу папіломи людини на перебіг ювенільного респіраторного папіломатозу і ефективність інтерферонотерапії у дітей

Вплив типів вірусу папіломи людини на перебіг ювенільного респіраторного папіломатозу і ефективність...
матеріали та методи

Вплив типів вірусу папіломи людини на перебіг ювенільного респіраторного папіломатозу і ефективність інтерферонотерапії у дітей
Р.Х. Нурмухаметов, Є.К. Онуфрієва, Ю.Л. Солдатська, М.Ю. БРОДСЬКИЙ
Кафедра хвороб вуха, горла і носа (зав. - член-кор. РАМН проф. Ю.М. Овчинников) ММА ім. І.М. Сеченова, відділення відновної хірургії гортані і трахеї МГДБ Св. Володимира (гл. Лікар - П.П. Касьянов), імунологічна лабораторія клініки акушерства і гінекології (дир. - проф. Н.М. Побединський) ММА ім. І.М. Сеченова
На початок...
Визначення типу вірусу папіломи людини (ВПЛ) за допомогою полімеразної ланцюгової реакції справили у 40 дітей, які страждають на ювенільний респіраторним папіломатозом. Терапія різними препаратами інтерферону (ІФН) на додаток до хірургічного лікування проводилася у 18 пацієнтів (основна група) з важким перебігом захворювання. Решті 22 хворим (контрольна група) з менш важким перебігом папіломатозу проводилося тільки хірургічне лікування. У більшості пацієнтів основної та контрольної груп виявлявся 6/11 тип вірусу, причому приблизно в рівних співвідношеннях (72,2 і 77,3% відповідно). При оцінці впливу типу ВПЛ на ефективність ІФН-терапії хворих основної групи виявилося, що відсоток хворих з ефективною і неефективною ІФН-терапією в кожній категорії (в залежності від типу ВПЛ) приблизно рівний, тобто кореляції між типом ВПЛ та ефективністю лікування хворих препаратами ІФН не спостерігається.
Ключові слова:
ювенільний респіраторний папіломатоз, вірус папіломи людини, препарати інтерферону
Ювенільний респіраторний папіломатоз (ЮРП) - найбільш часто зустрічається пухлина верхніх дихальних шляхів, що займає перше місце серед причин виникнення хронічної обструкції гортані у дітей. Папілома є доброякісною пухлиною, що розвивається з плоского або перехідного епітелію. Однак у дітей в зв'язку з частим рецидивированием, бурхливим зростанням і анатомічної вузькістю просвіту гортані ЮРП клінічно часто протікає важко, з явищами стенозу гортані, який при ненаданні своєчасної допомоги може призвести до летального результату [3].
Вважається, що етіологічним агентом даної патології служить вірус папіломи людини (ВПЛ) - представник сімейства паповавирусов. В даний час виділено 73 типи вірусу. Геномна організація всіх папилломавирусов подібна. Типи і підтипи визначаються за ступенем гомологичности послідовності полинуклеотидов. ДНК кожного окремого типу не менше ніж на 50% гомологична ДНК інших вірусів цього класу. Віруси, гомологічні одна одній більше, ніж на 50%, але менше, ніж на 100%, складають підтипи, наприклад 6 і 11, 16 і 18, 31 і 33 типи ВПЛ [8].
Для виявлення пацієнтів, інфікованих ВПЛ, і визначення типів вірусу застосовуються полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) і in situ гібридизація [12, 17]. Всі описані типи ВПЛ визначаються в первинно-доброякісних і злоякісних новоутвореннях шкіри та слизової оболонки. Кожен тип, як правило, характеризується певною клінічною специфікою уражень.
У пацієнтів з доброякісним перебігом папіломатозу гортані, за даними літератури, найчастіше виявляються ВПЛ-11 та / або ВПЛ-6 [11, 12, 17-20]. Причому AK Sun [20] вказує, що ВПЛ-6 достовірно частіше зустрічався при ювенільному папилломатозе в порівнянні з захворюванням у дорослих. Однак інші автори, навпаки, стверджують, що в дитячому віці більш поширеним є тип 11, а асоційоване з ним захворювання протікає м'якше, ніж при ВПЛ-6 [19]. FL Rimmel і співавт. [18], навпаки, вважають, що інфікування ВПЛ-11 обумовлює більш агресивний перебіг папіломатозу у дітей у порівнянні з ВПЛ-6. Інші дослідники будь-яких кореляцій між типом вірусу (6 або 11) і тяжкістю перебігу папилломатоза не виявили [13].
Представляють інтерес зустрічаються в літературі вказівки на можливість латентного перебігу ВПЛ-інфекції статевої сфери і дихальних шляхів. Зокрема, J. Сzеglеdy і співавт. [9] за допомогою in situ гібридизації показали, що в шийці матки клінічно і цитологічних здорових жінок ВПЛ-6 і 11 і ВПЛ-16 і 18 виявлялися з частотою 23 і 8% відповідно. Цей факт представляє інтерес в зв'язку з існуючим на сьогоднішній день становищем про інфікування дітей ВПЛ при проходженні родових шляхів [5, 14, 22]. Велике дослідження, присвячене вивченню частоти вертикальної трансмісії ВПЛ, було проведено в 1996 р в Трієсті (Італія) [5]. Дослідження охоплювало 170 вагітних жінок, яким була проведена ендоцервікальна біопсія з наступним вивченням зразків за допомогою ПЛР (визначалися типи 6, 11, 16, 18, 31, 33, 52). Згідно з отриманими даними, інфікованість жінок склала 31,2%, а новонароджених - 21,7% (за результатами дослідження слизу з ротової порожнини і глотки). Причому інфікування дітей відбулося у 57,14% жінок, ВПЛ-позитивних на момент пологів. Автори також підкреслюють значення високих титрів вірусу для реалізації вертикальної передачі.
Основою терапії ЮРП на сьогоднішній день залишається хірургічне вплив. Незважаючи на вдосконалення хірургічних методів лікування ЮРП, їх використання в ізольованому вигляді не вирішує завдання терапії цього захворювання, так як після хірургічного видалення папілом дуже високий відсоток рецидиву, з чим пов'язана необхідність проведення множинних повторних операцій [2, 6, 7, 15, 21] . В даний час найбільш патогенегіческі виправданим і перспективним є застосування, поряд з хірургічним методом, препаратів інтерферону (ІФН) [1, 2, 4, 10, 16].
Мета цього дослідження - визначення частоти виникнення типів ВПЛ в зразках віддалених папілом у дітей, які страждають ЮРП, а також вивчення впливу типів вірусу на перебіг захворювання та ефективність лікування препаратами ІФН.
матеріали та методи
Визначення типу вірусу папіломи людини справили у 40 дітей, які страждають ЮРП. У 18 пацієнтів перебіг захворювання був важко (поширена і обтурирующая форми папіломатозу гортані), з частими рецидивами (3-6 разів на рік), які вимагали оперативного втручання у зв'язку зі стенозом дихальних шляхів; тому їм проводилося лікування різними препаратами a-ІФН. Ці діти склали основну групу. Решта 22 хворих характеризувалися менш тяжким перебігом папіломатозу (обмежена, рідше - поширена форма, більш тривалі межрецідівного періоди) і склали контрольну групу. Пацієнтам контрольної групи проводилося тільки оперативне лікування.
Розподіл хворих за статтю та віком на момент початку лікування препаратами інтерферону (В контрольній групі - на момент першого надходження в клініку) представлено в табл. 1 .
Таблиця 1.Розподіл хворих за статтю та віком Група Число Пол Вік від 6 міс
до1 року від 1 року
до 3 років від 3 років
до 6 років від 6 років
до 9 років від 9 років
до 12 років від 12 років
до 15 років Основна 7 Хлопчики 1 - 3 3 - - 11 Дівчата 1 5 5 - - - Інструмент контрольно 10 Хлопчики - 2 4 - 2 2 12 Дівчата - 3 3 4 2 - Всього 40 2 10 15 7 4 2
Ізольований папилломатоз гортані відзначався у 28 (70%) дітей, у решти 12 (30%) пацієнтів пухлина вражала і глотку.
Серед дітей основної групи 5 пацієнтів отримували реаферон , 2 - Інтрон А , 5 - виферон , 6 хворим послідовно проводилася терапія віфероном і реаферон. Лікування починали після чергового видалення папілом мікроінструменту або мікроінструменту в поєднанні з СО2-лазером. Всі препарати, крім віферона, вводили внутрішньом'язово з розрахунку 100 тис МО / кг маси тіла (але не більше 3 млн МО) на одну ін'єкцію 3 рази в тиждень, віферон - в ректальних свічках по 1 свічці, що містить 250 тис МО (для дітей до 3 років) або 500 тис ME (для дітей 3 років і старше) -ІФН 3 рази в тиждень.
Визначення типу ВПЛ вироблено в 41 зразку папілом гортані, віддалених мікроінструменту при прямій микроларингоскопии у дітей основної групи, і в 22 зразках з контрольної групи.
Використана нами методика передбачає не ізольоване, а спільне визначення типів вірусу, подібних за структурою, тобто 6 і 11, 16 і 18, а також ВПЛ-31. Виявлення ДНК ВПЛ проводилося за допомогою ПЛР, в основі якої лежать багаторазово повторювані цикли синтезу (ампліфікація) специфічної області ДНК-мішені в присутності термостабільної ДНК-полімерази, дезоксинуклеозидтрифосфатов, відповідного сольового буфера і олігонуклеотидних запалів - праймерів, що визначають межі амплифицируемого ділянки ДНК-мішені. Неспецифічне визначення папилломавирусов проводили з використанням пари вироджених олігонуклеотидних праймерів, вибраних на консервативні ділянки Е6 і Е7-областей геному ВПЛ. При цьому ампліфікувати фрагмент розміром 402-420 нуклеотидних пар (НП). Для типування груп 6/11, 16/18 та 31 отримані фрагменти використовували як матрицю для подальшої ампліфікації з трьома розділеними парами, специфічними для даних груп праймерів. При наявності вірусу потрібного типу синтезировался фрагмент довжиною 252, 304 або 281 НП відповідно.
Далі ...

написати коментар