- Йога начинающим видео
- Хулахуп танец видео
- Смотреть моя тренировка видео
- Видео тренировки александра емельяненко
- Как правильно крутить обруч на бедрах видео
- Тренировки в кудо видео
- Тренировки рой джонса видео
- Йога онлайн смотреть видео
- Тренировки костя дзю видео
- Видео тренировки роя джонса
- Видео спинальной
- Айенгар йога видео
- Йога для женщин на видео
- Правильно крутить обруч видео
- Плиометрические отжимания видео
- Новости

Управление Здравоохранения Евпаторийского городского совета (С)2011
67 гостей
Вірус імунодефіциту людини -ВІЧ, Human immunodeficiency virus
Вірус імунодефіциту людини -ВІЧ, Human immunodeficiency virus - HIV
Вживаючи термін "СНІД", не всі знають, що це не самостійне захворювання, а термінальна стадія ВІЛ-інфекції - інфекції, викликаної Вірусом імунодефіциту людини
ВІЛ належить до сімейства Retriviridae, підродини Lentivirus. Це ретровірус, використовуючи фермент зворотний транскриптазу, трансформує свій РНК-геном в ДНК, яку вбудовує в гени клітини-господаря. По суті, господарем тепер стає ВІЛ, тому що нові клітини, одержувані в результаті поділу зараженої, вже несуть в собі вірусні гени. Виправдовуючи свою назву (Lentivirus - "повільний" вірус), ВІЛ нікуди не поспішає - інкубаційний період) до появи симптомів хвороби) триває від декількох місяців до 8 - 10 років (у 2/3 інфікованих осіб протягом 5 років не було ніяких симптомів СНІДу ). Раніше ВІЛ-інфекція проявляє себе, будучи переданої при переливанні крові, а також - при ослабленому імунітеті господаря (наркоманія і гомосексуалізм не тільки збільшують ризик зараження, але і є факторами придушення імунітету).
ВІЛ руйнує Т4-лімфоцити ( "хелпери" - помічники клітинного імунітету), а також знищує макрофаги. Як наслідок порушується імунологічний баланс - зростає активність Т-лімфоцитів "супресорів", що пригнічують клітинний імунітет. Розвивається імунологічна недостатність - організм виявляється не в змозі боротися з найпростішими інфекціями, не кажучи вже про грізних. "У зростання" йдуть дрімаючі в організмі багатьох з нас інфекції - герпетична, цитомегаловірусна, грибкові - кандидоз, криптококоз, прогресує туберкульоз, паразитарні захворювання - токсоплазмоз, амебіаз, пневмоцистна пневмонія. Зниження клітинного імунітету веде до виникнення пухлин, перш за все - саркоми Капоші.
Слід зазначити, що вірними помічниками ВІЛ-інфекції є практично все збудники ІПСШ, присутні в нашій галереї, з іншого боку, ВІЛ створює найсприятливіші умови для зараження цими інфекціями.

Існує два типи ВІЛ: ВІЛ-1 і ВІЛ-2. Другим заражаються рідше, він має більший інкубаційний період. Проте спокушатися щодо "безпеки" ВІЛ-2 не варто. Вірус ВІЛ знаходиться в крові, спермі, вагінальному секреті.
Тому зараження можливо там і тоді, де і коли ці біологічні рідини можуть потрапити в кров іншої людини. Так, в Росії в даний час зараження найчастіше відбувається в середовищі вживають наркотики при повторному використанні забрудненого кров'ю шприца.
Перші симптоми ВІЛ інфекції неспецифічні: "невмотивоване" підвищення температури тіла, слабкість, пітливість, підвищена стомлюваність, головний біль, кашель, розлад шлунку, схуднення, збільшення печінки, селезінки і лімфовузлів. Подальші прояви залежать від поєднання численних і різноманітних інфекцій, що розвиваються на тлі СНІДу.
Віруси імунодефіциту (HIV) приєднуються до глікопротеінові рецепторів на поверхні лімфоцита. СЕМ х 110.620. Умовні кольору.
Будова ВІЛ, антигенний склад *
* Цей "заумний" матеріал може виявитися вельми корисним, а іноді і необхідним далі, при з'ясуванні переваг і недоліків різних методів діагностики ВІЛ. Крім того, він незамінний при самостійній "розшифровці" результатів аналізів
На поверхні ВІЛ присутні численні виступи, що складаються з білково-полісахаридних комплексів - глікопротеїнів. Саме від них залежить здатність вірусу приєднуватися до Т4 рецепторів на поверхні лімфоцитів, проникати в них і розноситься з лімфоцитами по всьому організму.
У конусоподібної серцевині вірусу знаходяться тяжі РНК - геном вірусу. Основними структурними генами ВІЛ, що кодують трансляцію білків, з яких в подальшому будується вірус, є gag (group - specificantigens), pol (polymerase), env (envelope).
До регуляторних генам відносяться: tat (трансактиватор всіх вірусних білків), rev (регулятор експресії віріони білків), vif (віріони інфекційний чинник), vpr (функції залишаються неясними), nef (негативний фактор експресії), vpx (функції невідомі). Ген gag кодує білки серцевини. Первинним продуктом трансляції цього гена є білок-попередник р53, що піддається розщепленню двома шляхами. При одному варіанті розщеплення з білка-попередника утворюється 3 структурних білка серцевини: р15, р17, р24. Інший варіант передбачає утворення проміжного білка р39, який розщеплюється на білки р17 і р24. У сироватці крові більшості інфікованих ВІЛ виявляються антитіла до цих антигенів. Зазвичай антитіла до р24 виявляються на ранній стадії ВІЛ-інфекції, причому білок р24 є більш імуногенні, ніж р17. Ген pol кодує білки Р51 / 66 і р31, які представляють собою зворотну транскриптазу і ендонуклеази ВІЛ.
Найбільш імуногенними білками вірусної частинки, як і інших відомих форм вірусних інфекцій, є поверхневі глікопротеїни gp 160/120, а також трансмембранний білок gp 41, які кодуються геном env. Антитіла до білків, які кодуються геном env, з'являються відносно рано, виявляються у 98% інфікованих і більш стабільні, ніж антитіла до інших антигенів. Антитіла до основних внутрішніх білок ВІЛ (р17 і р24) виявляються приблизно у 75% інфікованих і не частіше, ніж у 50% хворих з клінічно вираженою СНІДом. Роль регуляторних білків і їх серологічна активність потребують подальшого вивчення.
Сучасні методи ІМУНОЛОГІЧНОЇ І ГЕНЕТИЧНОЇ ДІАГНОСТИКИ ВІЛ-інфекції
При хворобах з тривалим інкубаційним періодом і різноманітною клінічною симптоматикою, однією з яких є СНІД, виключно велика роль лабораторних методів діагностики. Існує кілька методів лабораторної діагностики СНІДу: виділення вірусу, виявлення антитіл до ВІЛ, виявлення антигенів або інших компонентів ВІЛ, виявлення імунологічних порушень.
I. Виявлення антитіл до ВІЛ у сироватці крові - найбільш поширений прийом в лабораторній діагностиці ВІЛ-інфекції. Хоча позитивний результат дослідження при визначенні антитіл до ВІЛ не є остаточним критерієм оцінки стану і прогнозу хвороби, він дає можливість з достатньою часткою ймовірності встановити факт інфікування. Даний вид діагностики має досить високу чутливістю , Проте далеко не 100% специфічний через можливість отримання хибнопозитивних і помилково негативні результати. Це відбувається через те, що в інфікованому організмі на різних стадіях хвороби продукуються і персистируют антитіла до різних структурних і регуляторних білковим компонентам ВІЛ (опис останніх див. вище ). ля виявлення антитіл до ВІЛ найчастіше використовують метод імуноферментного аналізу ( ІФА ). При проведенні ІФА в 3 - 5% випадків можливі помилково негативні результати - якщо інфікування відбулося відносно недавно і рівень антитіл ще дуже низький, або в термінальній стадії хвороби, яка характеризується важким ураженням імунної системи з глибоким порушенням процесу антитілоутворення. Тому при наявності даних, що свідчать про контакт з інфікованими ВІЛ зазвичай проводять повторні дослідження через 2 - 3 міс. Але навіть при повторних дослідженнях вдається виявити не всіх інфікованих осіб, так як існують сероотріцательние носії ВІЛ, тобто ті, у яких антитіла не виробляються протягом дуже тривалого часу. У США кількість таких помилково негативні досліджень становить близько 1% на рік. Причиною хибнопозитивних результатів ( "виявлення" ВІЛ там, де його немає) при постановках ІФА є наявність у пацієнтів аутоімунних процесів, антитіл до ревматоїдного фактору, вірусу Епштейна - Барр, молекулам головного комплексу гістосумісності. Частота хибнопозитивних результатів при використанні різних тест-систем (різних діагностичних наборів) коливається від 0,02 до 0,5%. Число помилкових результатів можна значно знизити при використання в якості антигену рекомбінантних білків ВІЛ. Чутливість і специфічність тест-систем для ІФА в цьому випадку можна порівняти з імунним блоттинга.
Імунний блот (імуноблот, Western Blot, вестерн-блот) - поєднує в собі імуноферментний аналіз (ІФА) з попередніми електрофоретичної перенесенням на нітроцелюлозну смужку (стрип) антигенів вірусу. Імуноблот (ІБ) включає в себе кілька стадій. Підготовка стрипа. Попередньо очищений і зруйнований до складових компонентів вірус імунодефіциту (ВІЛ) піддається електрофорез , При цьому входять до складу ВІЛ антигени розділяються по молекулярній вазі. Потім методом блоттинга (аналог видавлювання на "промокашку" надлишку чорнила) антигени переносять на смужку нітроцелюлози, яка відтепер містить невидимий поки оком спектр антигенних смуг, характерний для ВІЛ. Дослідження проби. На нітроцелюлозну смужку наноситься досліджуваний матеріал (сироватка, плазма крові пацієнта і т.п.), і якщо в пробі є специфічні антитіла, то вони зв'язуються зі строго відповідними їм (комплементарними) антигенними смугами. В результаті подальших маніпуляцій результат цієї взаємодії візуалізується - робиться видимим. Трактування результату. Наявність смуг в на певних ділянках нітроцелюлозній пластини підтверджує присутність в дослідженої сироватці антитіл до строго певним антигенів ВІЛ.

ВІЛ Western Blot - тест-система фірми Organon Teknika для визначення антитіл до ВІЛ у сироватці і плазмі крові.
Смужки-стрипи з блоту. Читання результатів.
У позитивному контролі і досліджуваному зразку присутні смуги:
gag p17, p24, p55 (оболонка) pol p31 (ендонуклеаза), p51, p65 (зворотна транскриптаза) env gp 41 (трансмембранний білок)
gp120, gp 160 (поверхневі структури)
Смужка А - Позитивний контроль
Смужка В - Слабопозитивний контроль
Смужка С - Негативний контроль
Смужка D - Позитивний зразок (виявлено присутність антитіл до ВІЛ-1)
В даний час ІБ є основним методом для підтвердження наявності вирусспецифических антитіл в досліджуваній сироватці. У деяких випадках ВІЛ-інфекції, до розвитку сероконверсии , Специфічні антитіла більш ефективно виявляються методом ІБ, ніж ІФА. При дослідженні методом ІБ виявлено, що найчастіше в сироватках хворих на СНІД виявляються антитіла до gp 41, причому виявлення р24 у осіб, обстежуваних з профілактичною метою, вимагає додаткових досліджень на наявність у них ВІЛ-інфекції. Тест-системи для ІБ на основі рекомбінантних білків, отриманих шляхом генної інженерії, виявилися більш специфічними, ніж звичайні системи на основі очищеного вірусного лизата. При використанні рекомбінантного антигену формується не дифузна, а чітко виражена вузька смужка антигену, легко доступна для обліку та оцінки.
Всесвітня Організація Охорони Здоров'я (ВООЗ, 1991) рекомендує наступну оцінку результатів досліджень, проведених методом ІБ:
Позитивний результат - виявлення в сироватці антитіл до двох вірусних білків з групи env з наявністю або відсутністю білків - продуктів інших структурних генів (gag, pol);
Негативний результат - відсутність антитіла до вірус-специфічних білків;
Невизначений результат - виявлення в сироватці антитіл до білків з груп gag, pol.
Як правило, невизначена реакція в ІБ пов'язана з наявністю білків - продуктів експресії гена gag ВІЛ-1 р15 / 17, р24 і р55, що може свідчити як про хибнопозитивної реакції, так і про можливості інфікування ВІЛ-1.
Для виявлення антитіл у інфікованих ВІЛ застосовують також ряд інших методів: імунофлуоресценція, радіоіммунопреціпітацію, агглютинацию.
Метод непрямої імунофлуоресценції відносно простий при наявності люмінесцентного мікроскопа і кваліфікованого персоналу, здатного проводити облік результатів. Як антигенів в цій реакції використовуються різні клітинні лінії, інфіковані ВІЛ (MOLT, H9, СЕМ, HUT-78 і ін.).
Радіоіммунопреціпітація є найбільш чутливим методом виявлення антитіл до ВІЛ і може використовуватися як метод експертної діагностики при невизначених результатах ІБ. В основі методу лежить використання білків ВІЛ, мічених радіоактивним йодом. Чи не отримав широкого поширення через необхідність застосування радіоактивних матеріалів та спеціального обладнання. До того ж для постановки реакції потрібно культивувати інфіковані вірусом клітини. Тому радіоіммунопреціпітація застосовується переважно в науково-дослідних лабораторіях.
Метод аглютинації є одним з найбільш простих, чутливих і специфічних для визначення антитіл до ВІЛ. Він не вимагає спеціального обладнання, необхідний лише деякий досвід в інтерпретації результатів.
II. Виявлення антигенів ВІЛ в досліджуваному матеріалі засновано головним чином на тих же принципах, що і виявлення антитіл, але з деякими модифікаціями. У зв'язку з низьким вмістом антигенів в крові, а також тим, вони циркулюють у вигляді імунних комплексів чутливість складає, в середньому, 60%. Тому і ммуноферментние діагностикуми на антигени ВІЛ, в основному, використовуються тільки для експериментальних і науково-дослідних цілей.
III. Виділення вірусу.
Метод культуральної діагностики ВІЛ-інфекції широко не використовується, хоча має високу специфічність. Він вимагає дотримання особливих умов безпеки, дорогих і дефіцитних середовищ, значних витрат часу, і, крім того, за даними деяких дослідників, чутливість методу коливається від 25 до 75%.
Молекулярно-біологічні методи. Успіхи в розвитку молекулярної біології дозволили вивести пряме виявлення збудників інфекцій на принципово новий якісний рівень. Полімеразна ланцюгова реакція ( ПЛР ) Завдяки високій чутливості, специфічності, відтворюваності в даний час широко використовується в біотехнології, генетики, судової медицини, для діагностики генетичних і вірусних захворювань, в тому числі і ВІЛ-інфекції. Даний метод дозволяє виявити геном ВІЛ, вбудований в геном уражених лімфоцитів. Це можливо при наявності вірусних генів всього в 1 з 5000 клітин, навіть в період відсутності в крові антитіл або при недостатньому їх рівні для виявлення існуючими стандартними методами. Так як методом ПЛР визначають не антитіла до продуктів генів ВІЛ, а безпосередньо генетичні структури, він незамінний при діагностиці ВІЛ-інфекції в серонегативний період , У дітей, народжених ВІЛ-інфікованими матерями ( персистенция материнських антитіл у дитини може досягати 15 міс.), при невизначених результатах ІБ , Одночасної діагностики множинних інфекцій, що зустрічаються при СНІДі, диференціальної діагностики між ВІЛ-1, ВІЛ-2 і іншими вірусними захворюваннями, визначенні співвідношення між клітинним та позаклітинним вірусом, при випробуваннях на тваринах хіміопрепаратів і вакцин проти СНІДу, дослідженні банків крові та препаратів з крові .
Як матеріал для дослідження в ПЛР може бути використана ДНК, виділена не тільки з свежеполученной клітин і тканин, але і з заморожених, висушених або фіксованих препаратів, що мають частково зруйновані нуклеїнові кислоти.
Головним недоліком методу є дорожнеча обладнання та реактивів для його проведення, але в кінцевому рахунку застосування ПЛР економічно вигідно, тому що значно знижує кількість стадій і тривалість досліджень на ВІЛ-інфекцію. Метод ПЛР зручний для вивчення і діагностики ВІЛ-інфекції, особливо в тих випадках, коли серологічні тести або культивування вірусу ускладнені або малоефективні. Разом з тим не можна не відзначити можливість отримання при проведенні ПЛР хибнопозитивних реакцій.
Таким чином, сучасні методи лабораторної діагностики ВІЛ-інфекції дозволяють з достатнім ступенем надійності проводити дослідження по визначенню антитіл до ВІЛ та ідентифікації його компонентів. Однак постійна мінливість вірусу, що не має аналогів в порівнянні з мінливістю інших відомих вірусів людини, створює ризик отримання в дослідженнях помилково негативні результати. Тому використовувані в практичній роботі для діагностики ВІЛ-інфекції методи вимагають постійного вдосконалення.
IV. Виявлення імунологічних порушеннях. Відомо, что в Основі розвитку СНІДу лежить, в Першу Черга, руйнування Т-лімфоцитів-хелперів, Які маркуються моноклональними антітіламі ОКТ4 + (CD4). У зв'язку з цим проведення діагностики і спостереження за прогресуванням захворювання неможливо без контролю субпопуляції Т-хелперів, який найбільш зручно здійснювати за допомогою лазерного клітинного сортувальника. При слабо вираженою ВІЛ-інфекції кількість Т-лімфоцитів - надзвичайно варіабельний показник. В цілому, зниження числа клітин OKT4 + (абсолютне і відносне) виявляється у осіб, ВІЛ-інфікування яких відбулося не менше року назад, З іншого боку, на ранніх стадіях інфекції нерідко виявляється різко підвищеним число OKT8 + (CD8, Т-супресори) як в периферичної крові, так і в збільшених лімфовузлах.
При вираженому СНІД абсолютна більшість хворих має знижене загальне число Т-лімфоцитів (менше 1000 в 1 мкл крові, в тому числі лімфоцитів OKT4 + - менш ніж 22 в 1 мкл, тоді як абсолютне значення вмісту ОКТ8 + залишається в межах норми). Відповідно, різко знижується співвідношення ОКТ4 + / ОКТ8 +. Відповідь Т-лімфоцитів in vitro на стандартні антигени і мітогени знижується в суворій відповідності з відносно зниженим числом OKT4 +.
Для пізніх стадії СНІДу характерні загальна лимфопения, нейтропенія, тромбоцитопенія (відповідно, зниження числа лімфоцитів, нейтрофілів і тромбоцитів), анемія. Ці зміни можуть бути наслідком центрального пригнічення кровотворення за рахунок ураження кровотворних органів вірусом, а також - аутоімунного руйнування клітинних субпопуляції на периферії. Крім того, для СНІДу характерно помірне збільшення кількості гамма-глобулінів з домінуючим збільшенням вмісту IgG. Хворі з вираженими симптомами СНІДу нерідко мають підвищений рівень IgA. На деяких стадіях захворювання істотно підвищується рівень таких маркерів СНІДу, як β1-микроглобулин, кіслотостабільний α-інтерферон, α1-тимозин. Те ж відбувається з секрецією вільного неоптерина - метаболіти макрофагів. Поки не представляється можливим оцінити відносну значимість кожного з перерахованих тестів, число яких постійно зростає. Тому їх слід розглядати у взаємодії з маркерами ВІЛ-інфекції як іммуновірусологіческого, так і цитологічного характеру.
Для клінічного аналізу крові характерні лейкопенія, лімфопенія (відповідно, зниження числа лейкоцитів і лімфоцитів). Важливий імунологічний симптом СНІДу - алергія, виявляти при постановці різноманітних шкірно-алергічних проб, наприклад, з туберкуліном. При підозрі на імунну недостатність ставлять шкірний тест гіперчутливості уповільненої типу з туберкуліном (реакція Манту). У разі негативного результату дослідження продовжують і визначають реактивність лімфоцитів в культурі на конканавалін А чи фитогемагглютинин. Якщо індекс стимуляції клітин> 15 при позитивній туберкулінової пробі, підозра знімається. При негативній реакції на туберкулін і індексі стимуляції <15 діагностичний пошук продовжують. В подальшому визначають ОКТ4 + клітини (CD4, Т-хелпери). Якщо їх менше 400 в 1 мкл цільної крові і співвідношення ОКТ4 + до ОКТ8 + дорівнює 1, то цілком обґрунтовано ставиться діагноз СНІДу. При змісті Т-хелперів> 400 в 1 мкл крові і співвідношення ОКТ4 / OKT8 (допоміжних клітин і супресорів) більше 1, діагноз ставиться під сумнів.
