СКРИНІНГ нейроендокринних КОМПОНЕНТУ В РАКУ ШЛУНКА - Сучасні проблеми науки та освіти (науковий журнал)

1. бібліографічна ПОСИЛАННЯ

1 Кіт О.І. 1 Дерижанова І.С. 2 Карнаухов Н.С. 2, 1 Новикова И.А. 1 Ульянова Є.П. 1 Тріфанов В.С. 1

1 ФГБУ «Ростовський науково-дослідний онкологічний інститут» Міністерства охорони здоров'я Росії

2 ФГБОУ ВО Ростовський державний медичний університет МОЗ РФ

Проведено патоморфологічні скринінг нейроендокрінного компонента в 48 раках шлунка. Гістологічні зрізи забарвлювалися гематоксиліном-еозином, алціановим синім + PAS - реакція. Для виявлення нейроендокрінного компонента і оцінки проліферативної активності проводилося імуногістохімічне дослідження c антитілами до Сhromogranin A, Synaptophysin, Neuron-Specific Enolase (NSE), Ki-67. Нейроендокринний компонент виявлено в 58,3% пухлин. 4 пухлини (8,3%) виявилися нейроендокринними раками. 4,2% пухлин розцінені, як змішані адено- нейроендокринні карциноми (нейроендокринний компонент більш 30, але менше 70%). Виражений нейроендокринний компонент (більше 10, але менше 30%) виявлено в 12,5% спостережень. Третина всіх досліджених пухлин (33,3%) характеризувався осередкової нейроендокринної дифференцировкой (менше 10%). У 8 пухлинах (16,6%) в ділянках, що мають будову перстневідноклеточний раку, виявлено амфікрінний компонент.

рак шлунку

нейроендокринний компонент

нейроендокринний рак

амфікрінний перстневідноклеточний рак.

1. Дерижанова І. С. Пухлини дифузійної ендокринної системи - карціноіди. - Ростов н / Д .: Вид-во Ростовського ун-ту, 1991. - 288 с.

2. Дерижанова І.С., Мендоса Л., Салмн А. Ендокринні пухлини шлунка // Арх. патології. - 1995. - Т. 57. - № 4. - С. 16-20.

3. Кіт О.І. Нейроендокринні, клінічні і морфологічні аспекти раку шлунка. - Новочеркаськ: Изд-во «Лік», 2014. - 187 с.

4. Ferlay J, Shin HR, Bray F, et al. Estimates of worldwide burden of cancer in 2008: Додати GLOBOCAN 2008 // Int J Cancer. 2010. 127. P. 2893-917.

5. Fiocca R, Villani L, Tenti P, et al: Characterization of four main cell types in gastric cancer: foveolar, mucopeptic, intestinal columnar and goblet cells. An histopathologic, histochemical and ultrastructural study of "early" and "advanced" tumours // Pathol Res Pract. - 1987. - 182. - P. 308-325.

6. Hoffmann W., Stem cells, self-renewal and cancer of the gastric epithelium // Curr. Med. Chem. 19. - 2012. - P. 5975-5983.

7. La Rosa S, Inzani F, Vanoli A, et. al. Histologic characterization and improved prognostic evaluation of 209 gastric neuroendocrine neoplasms // Hum Pathol. - 2011. - 42. - P. 1373-1384.

8. Lauren P. The two histological main types of gastric carcinoma: diffuse and so-called intestinal type carcinoma. An attempt at a histoclinical classification // Acta Pathol. Microbiol. Scand. - 1965. - Vol. 64. - P. 31-49.

9. Solcia E, Arnold R, Capella C, et al. Neuroendocrine neoplasms of the stomach. In: Bosman FT, Jaffe ES, Lakhani SR, Ohgaki H, editors. WHO classification of tumors of the digestive system. Lyon: International Agency for Research on Cancer. - 2010. - P. 64-68.

Рак шлунка (РЖ) - одне з найпоширеніших онкологічних захворювань в світі, займає четверте місце в структурі захворюваності і друге в структурі смертності [3]. Існує безліч морфологічних класифікацій РЖ, заснованих на анатомічному принципі, гістологічному будові, відомостях про цито-, гисто- і морфогенезі, молекулярно-біологічні особливості. Широке поширення отримала гистогенетическая класифікація Lauren, згідно з якою РЖ ділять на два основних типи: 1 - інтестинального (кишковий) і 2 - дифузний [8].

Інтестинального пухлини, як правило, є екзофітні, часто покривається виразками, асоційовані з атрофічним гастритом і кишковою метаплазією, інфікуванням Hel. Pylori; клітини їх циліндричної форми, будують залози. Новоутворення називають аденокарцинома: високодиференційованими при чітко визначених залізистих осередках і низкодиференційованими при переважанні солідних, альвеолярних і нечітко помітних залізистих структур.

Раки дифузного типу мають зовнішню форму інфільтрату, характеризуються ендофітний зростанням, зазвичай розвиваються при пангастріт без вираженої атрофії слизової оболонки. Клітини їх, округлої і неправильної форми, як правило, не пов'язані міжклітинних контактів, оточені широкими прошарками сполучної тканини і не утворюють залізистих структур. Крім того, виділяють також змішані форми [8].

Інтестинальний тип частіше зустрічається у чоловіків в старших вікових групах, в той час як при дифузному типі співвідношення між статями приблизно однакове, частіше уражаються особи в молодому віці. Інтестинальний тип аденокарцином переважає в Центральній і Південній Америці, Південно-Східної Азії та Східній Європі. Пухлини дифузного типу мають більш рівномірний розподіл. В останні десятиліття спостерігається зниження частки пухлин кишкового типу в країнах Північної Америки та Західної Європи, зі збільшенням поширеності дифузного типу РЖ. [4].

Класифікація Lauren РЖ отримала подальший розвиток. Гістохімічесіе, імуногістохімічні, молекулярно-біологічні методи дозволили уточнити старі і створити нові, молекулярні характеристики РЖ, згідно з якими виділяють 4 субтипу: 1) з хромосомальной нестабільністю - кишкового типу; 2) з геноміческой стабільністю - дифузного типу; 3) з мікросателітної нестабільністю і 4) пухлини, позитивні на вірус Епштейн - Барра. В даний час РЖ розглядається як захворювання, що виникає в результаті дисрегуляторні диференціювання стовбурових та прогеніторних клітин внаслідок запальних процесів в оточуючих тканинах [6]. У шлунку описано велике число популяцій прогеніторних / стовбурових клітин, тому ракові пухлини нерідко гетерогенні, в них виявляються різні типи гістологічної будови, що поєднуються між собою [1, 2]. Найменш вивчений компонент - нейроендокринний, який довгий час розглядався як похідне АПУД-системи, поза зв'язком з екзокринними пухлинами шлунка [1]. Хоча вважається встановленим, що нейроендокринні пухлини (НЕО), так само, як і інші епітеліальні пухлини слизової оболонки шлунка, відбуваються з мультіпотентних прогеніторних / стовбурових клітин зон шийок і істмусов залоз, проте вони мають термінологію і класифікації, відмінні від екзокринних епітеліальних новоутворень цього органу [9]. У той же час в залежності від клініко-патологічних ознак, стадії процесу, НЕО мають дуже різну поведінку, варіюючи від індолентних до жизнеугрожающих [3]. Відповідно пропонується широкий спектр терапевтичних можливостей - від простого ендоскопічного спостереження з видаленням пухлини або без нього до супресії гипергастринемии соматостатінових аналогами, резекції шлунка або гастректомія [7]. Нейроендокринний компонент може займати різну протяжність, мати різну морфологічну і функціональну характеристику. У той же час він часто залишається нерозпізнаним. Частота народження його, вплив на прогресію захворювання і вибір методу лікування не можна вважати достатньо вивченими.

Мета дослідження. Провести патоморфологічні скринінг нейроендокрінного компонента в раках шлунка на валовому операційному матеріалі.

Матеріали та методи. Досліджено 48 шлунків, віддалених частково або повністю з приводу раку. Не пізніше ніж через 30 хвилин після операції вони розкривалися по великій кривизні, розтягувалися на картоні так, щоб пухлина повністю була занурена в рідину, фіксувалися в 10% забуференном нейтральному формаліні протягом 24-х годин. Далі визначалася локалізація пухлини (кардіальний відділ, тіло і дно, антро-пілорична - дистальна частина), проводилися вимірювання (довжина, ширина, товщина) і паралельні поздовжні розрізи всій товщі стінки шлунка в зоні пухлини на відстані 3 мм один від одного в напрямку зверху вниз. Для дослідження вибиралася пластина пухлини з максимальною інвазією стінки. Отриману пластину пухлини з прикордонними відділами слизової оболонки ділили на шматочки розміром до 1,0 х 1,0 см, які проводилися звичайним методом і заливалися в парафін. Для виявлення нейроендокрінного компонента і оцінки проліферативної активності проводилося імуногістохімічне дослідження на зрізах з парафінових блоків, призначених для стандартного морфологічного дослідження, за допомогою моноклональних антитіл: до NSE (клон V1-H14, DBS, розведення 1:75), Synaptophysin (клон SP11, Thermo scientific, розведення 1: 100), Сhromogranin A (Thermo scientific, розведення 1: 400), Ki-67 (клон SP6, Thermo scientific, розведення 1: 200).

При оцінці гістологічної будови пухлини використовувалася класифікація пухлин шлунка ВООЗ 2010 року, з виявленням в процентному співвідношенні всіх компонентів і ступеня диференціювання [9]. Залежно від характеру продукції муцинов (PAS реакція + альціановий синій) все пухлини були розділені на раки кишкового, дифузного і змішаного типів. Експресія Ki-67 в ядрах пухлинних клітин була «вручну» підрахована при збільшенні 400 в межах 500 пухлинних клітин в кожної пухлини в області найвищої щільності Ki-67 - позитивних ядер ( «гарячі точки»). Будь-яке ядерне фарбування розглядалося як «позитивне» незалежно від його інтенсивності.

результати

Середній вік пацієнтів склав 61,6 років (36-83). Співвідношення М: Ж - 31:17 (1,82: 1). 23 пацієнтам була виконана гастректомія, 23 - дистальна резекція шлунка, 2 - проксимальна резекція. Більшість пухлин локалізувалися в дистальної частини шлунка (22), 15 - в проксимальної і 11 - в області тіла (45,83%, 31,25% і 22,92% відповідно). Макроскопічно переважали інфільтративно-виразкова та інфільтративна форми (28 і 7 відповідно - 72,9%), 12 пухлин мали форму блюдцеобразной виразки (25%), і одна - вузловий (2,1%). Середній розмір пухлин (в максимальному вимірі) - 7,6 см (2,5-16 см).

За системою TNM переважали III і IV клінічні групи (72,9%). У 66,6% випадків пухлина проростала за межі серозної оболонки шлунка (pT4). Метастази в регіонарних лімфатичних вузлах були виявлені у 79,2% пацієнтів. Середня кількість метастазів в лімфатичних вузлах - 6,8 (від 1 - до 21 уражених лімфатичних вузлів).

Більшість пухлин були розцінені як РЖ змішаного типу (19 - 39,5%) і дифузного (16 - 33,3%), в той час як кишкові форми склали меншість - 9 - 18,75%.

Клініко-анатомічна характеристика РЖ різних типів відповідала даним літератури. РЖ дифузного типу розвивався в більш молодому віці (середній - 53,7 років (53-73)), переважно у жінок (в 1,6 рази частіше), в проксимальному відділі шлунка (43,75%), переважали інфільтративна і інфільтративно виразкові форми (93,75%), великий розмір пухлини (середній в максимальному вимірі - 9,8 см). У 93,75% спостережень пухлина проростала за межі серозної оболонки стінки шлунка і метастазувала в регіонарні лімфатичні вузли в 87,5% (середня кількість метастазів - 7,8). Гістологічне будова пухлин було представлено переважно недиференційованим (56,25%) і перстневідноклеточний раками (37,5%).

РЖ кишкового типу розвивався в середньому у віці 59 років (47-77), переважно у чоловіків (в 2 рази частіше), в дистальному відділі шлунка (66,6%). Макроскопічно пухлини були представлені переважно виразковою формою з блюдцеобразнимі краями (55,5%). Середній розмір пухлин в максимальному вимірі був значно менше - 5,5 см. Поширення за межі серозної оболонки було виявлено лише в 44,5% випадків, а метастази в лімфатичних вузлах - в 66,6% (середня кількість - 5). Гістологічно пухлини переважно мали будова помірно диференційованої тубулярной аденокарциноми (77,8%).

РЖ змішаного типу характеризувався змішаної клініко-анатомічної характеристикою. Однак звертало увагу, що він виявлявся в середньому в 65,7 років (53-83), в 3,75 разів частіше у чоловіків, макроскопически був представленим переважно інфільтративно-виразкової (68,4%) - і инфильтративной (15,8% ) формами, за іншими характеристиками займав проміжні значення між РЖ дифузного і кишкового типу.

Всі пухлини (100%) поєднували в собі більше 1 гістологічного компонента, причому 25% пухлин поєднували в собі 4 і 5 різних компонентів. Переважали низько- диференційовану (муцинозная, мікропапіллярная, солідна аденокарцинома, нейроендокринна, змішана адено- нейроендокринна карцинома, перстневідноклеточний рак) і недиференційовані форми пухлин - 66,6%. Високодиференційовані форми були представлені папиллярной аденокарциномой (12,5%), помірно диференційовані - тубулярной аденокарциномой (20,9%).

Нейроендокринний компонент був виявлений в 58,3% пухлин. 4 пухлини (8,3%) після імуногістохімічного дослідження виявилися нейроендокринними раками (нейроендокринний компонент більш 70%). Вони розвивалися в віці 58,7 років (43-77), у всіх 4 спостереженнях у чоловіків, на кордоні тіла і антрального відділу шлунка (100%), у формі виразки, середній розмір пухлин в максимальному вимірі - 6,0 см (3 , 5-9 см). Всі 4 пухлини були обмежені межами серозної оболонки стінки шлунка (pT3), у 3 з 4 пацієнтів (75%) були виявлені метастази в лімфатичних вузлах, середня кількість - 5 (3-7 уражених л / у). Гістологічно пухлини були побудовані з альвеолярних, трабекулярних, солідних і псвевдожелезістих структурах. У всіх випадках (100%) при иммуногистохимическом дослідженні була вираженою експресія хромогранина А і сінаптофізіна. При низькодиференційованих формах нейроендокринних пухлин з індексом Ki-67 понад 55% в цитоплазмі клітин посилювалася експресія NSE. У межах однієї пухлини були виявлені ділянки гетерогенності нейроендокрінного компонента - за гістологічною структурою і рівнем проліферативної активності Ki-67 (від 20% до 100%), експресії хромогранина А і сінаптофізіна. Екзокринний компонент (осередки залозистого будови, персневидноклітини клітини) був виявлений у всіх нейроендокринних РЖ і становив від 1% до 30%.

2 пухлини (4,2%) були розцінені як змішані адено- нейроендокринні карциноми (нейроендокринний компонент більше 30%, але менше 70%). Вони мали різний гістологічну будову. В одному спостереженні пухлина в формі вузла, з інвазією до підслизового шару, була переважно залозистого будови (високо- диференційована папиллярная аденокарцинома - 50% з перстневідноклеточний і недиференційованим компонентами (по 10%), нейроендокринний компонент становив 35%. Індекс Ki-67 в екзокринних компоненті був 70%, а в нейроендокринної - 20%. Імуногістохімічно в нейроендокринної компоненті були виявлені різко виражена дифузна реакція з антитілами до NSE, слабо виражена вогнищева з антитілами до сінаптофізіну і негативні ательная з антитілами до хромогранина А. У другому спостереженні змішаної адено- нейроендокринної карциноми (MANEC) пухлина мала форму інфільтрату з виразкою, проростала серозную оболонку стінки шлунка, гістологічно на більшому протязі (70%) мала форму помірно диференційованої тубулярной аденокарциноми, з ділянками нейроендокрінного будови трабекулярного будови, з великими клітинами з еозинофільної цитоплазмою (30%). Після імуногістохімічного дослідження в цих клітинах була виявлена ​​помірно виражена дифузна Експрім ссія сінаптофізіна, слабо виражена експресія хромогранина А і вогнищева помірно виражена експресія NSE. Індекс проліферативної активності в обох компонентах в «гарячих точках» був більше 80%.

Виражений нейроендокринний компонент (більше 10, але менше 30%) був виявлений в 6 спостереженнях (12,5%). Третина всіх досліджених пухлин (33,3%) характеризувалася осередкової нейроендокринної дифференцировкой (менше 10%).

У 8 пухлинах (16,6%), що мають будову перстневідноклеточний раку, було виявлено амфікрінний компонент, тобто частина клітин, крім слизу, продукувала, ендокринні гранули, що дають різко виражену цитоплазматическую реакцію з антитілами до хромогранина А і помірно виражену цитоплазматическую реакцію з антитілами до сінаптофізіну.

Індекс проліферативної активності Кi-67 в «гарячих точках» незалежно від переважаючого гістологічного компонента у всіх спостереженнях (100%) був більше 80%. У ділянках, що мають будову високодиференційований папиллярной і помірно диференційованої тубулярной аденокарциноми, індекс проліферативної активності Ki-67 в «гарячих точках» становив понад 90%. У ділянках недиференційованого раку, в пухлинних емболах в просвітах судин, в ділянках периневрального зростання і в місцях максимальної інвазії він досягав 100%.

У 91,6% спостережень в перифокальною зоні росту пухлин була виявлена ​​гіперплазія нейроендокринних клітин в області шийок залоз. Причому в 50% випадків (24 пацієнта) вона мала характер дрібновузлового і аденоматозної, що за даними літератури розцінюється як передпухлинні процес для розвитку нейроендокринних пухлин. У відповідь на виражену нейроендокринну гіперплазію реагував покривний епітелій слизової оболонки шлунка розвитком глобоідной метаплазії (50% випадків) і вираженої фовеолярной гіперплазію (22,9%).

Обговорення результатів

Діагноз «нейроендокринних рак» ставлять при віявленні в пухлини при ІГХ з моноклональними антітіламі експресії хромогранина А чи сінаптофізіна. NSE показала менше спеціфічність, виявляв, кроме нейроендокринних елементів, в залізістіх структурах, епітеліоцітах недіференційованого компонента, в лімфоїдних клітінах, нервово Стовбур. Значення посиленої експресії NSE требует подальшої розшифровки. У Ранее проведення дослідженнях [2], спрямованостей на скринінг нейроендокрінного компонента в РЖ, Було Виявлено, что в 38% пухлина более 75% клітін містять ендокрінні гранули, тобто є ендокрінноклеточнімі. При цьому використовувалися аргірофільні і аргентафінние методики (імпрегнація сріблом по Grimelius, Masson і Pascual). Результати ІГХ з антитілами до хромогранина А і сінаптофізіну є більш специфічними. При вивченні експресії NSE отримані результати, подібні з аргірофільних і аргентафіннимі реакціями. Можливо, пухлинні клітини експресують якісь речовини, роль яких поки не ясна.

Однак нейроендокринний компонент займає значне місце в структурі РЖ, що має знаходити відображення в патологоанатомічних висновках для подальших досліджень. Необхідно визначити вплив нейроендокринної компонента на клінічні прояви, прогноз і вибір методів лікування. Також неясною залишається роль амфікрінного компонента. Наявність його дозволяє побічно підтвердити теорію, що ендокринні та екзокринні клітини відбуваються із загальної стовбурової шлункової клітини. Тому не варто розглядати епітеліальні пухлини шлунка в різних системах класифікації, а необхідно розробити спільну, єдину для всієї групи РЖ.

Висновки

1. Проведений патоморфологічні скринінг нейроендокрінного компонента в РЖ виявив його в різних співвідношеннях в 58,3% пухлин.
2. У перстневідноклеточний раках майже в 20% виявляється амфікрінний компонент, в якому клітини одночасно містять муцини і нейроендокринні гранули.
3. Нейроендокринний компонент займає значне місце в структурі РЖ, що має знаходити відображення в патологоанатомічних висновках для проведення подальших досліджень по визначенню впливу його на клінічні прояви, прогноз захворювання і вибір методів лікування.

бібліографічна ПОСИЛАННЯ

Кіт О.І., Дерижанова І.С., Карнаухов Н.С., Новикова И.А., Ульянова Е.П., Тріфанов В.С. СКРИНІНГ нейроендокринних КОМПОНЕНТУ В РАКУ ШЛУНКА // Сучасні проблеми науки та освіти. - 2016. - № 5 .;
URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=25092 (дата звернення: 01.06.2019).

Пропонуємо вашій увазі журнали, что видають у видавництві «Академія природознавства»

(Високий імпакт-фактор РИНЦ, тематика журналів охоплює всі наукові напрямки)