ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНЕ ДОСЛІДЖЕННЯ КОРЕКЦІЇ ХРОНІЧНУ ІШЕМІЇ нижніх кінцівок варденафілом

1. бібліографічна посилання

1 Лавриненко К.І. 1 Маль Г.С. 1 Орлова А.Ю. 1 Полякова О.В. 1 Татаренкова І.А. 1

1 ГБОУ ВПО «« Курський державний медичний університет »Міністерства охорони здоров'я Російської Федерації

Експериментальна робота проведена на щурах лінії Wistar. Ішемію моделювали на м'язах гомілки щурів. Кровообіг в кінцівках оцінювали за допомогою лазерної доплерівської флоуметріі (ЛДФ) і гістологічного дослідження. Корекцію ішемії проводили внутрішньошлунковий введенням варденафілу (Левітра, Bayer) в дозі 0,9 мг / кг. У групі порівняння вводили пентоксифілін в дозі 60 мг / кг. Результати оцінювали на 21-е і 28-е добу. Рівень мікроциркуляції висловлювався в перфузійних одиницях. Отримані результати доводять, що варденафіл покращує перфузію ішемізованих м'язів за рахунок стимуляції неоангіогенезу; пентоксифілін також робить позитивний вплив на неоангіогенез, але до 28-ї доби рівень мікроциркуляції не досягає нормальних значень. Значний антиішемічний ефект варденафіла диктує необхідність подальших експериментальних та клінічних випробувань з метою профілактики і лікування локальної ішемії в хірургії.

ішемія

варденафіл

неоангіогенез

1. Верткин А. Л. Клінічна фармакологія інгібіторів фосфодіестерази 5: порівняльний аналіз. http://www.intensive.ru/php/content.php?group=2&id=963.

2. Казанчан П.О., Попов В.А., Дебелий Ю.В. і співавт. Хірургічна реваскуляризація при критичній ішемії. Ангіологія і судинна хірургія. 2000; 3: 32-5.

3. Колесник І.М., Лазаренко В.А., Покровський М.В. Вплив фармакологічного прекондиціонування силденафилом і варденафілом на стан мікроциркуляторного русла в ишемизированной скелетної м'язі // Курський науково-практичний вісник «Людина і здоров'я». - 2015. - № 1. - С. 83-86.

4. Покровська Т.Г., Чулюкова Т.Н., Покровський М.В. Ендотеліопротектівние ефекти силденафілу і тадалафілу при експериментальному моделюванні l-name-індукованого дефіциту оксиду азоту // Кубанський науковий медичний вісник. - 2009. - № 4. - С. 136-145.

5. Рекомендації Російського товариства ангіологія і судинних хірургів. Діагностика та лікування хворих із захворюваннями периферичних артерій. М .: 2007; 8.

6. American Heart Association. Heart Disease and Stroke Statistics - 2004. Dallas; 2004.

7. Desouza C., Akers D., Parulkar A. et al. Acute and prolonged effects of sildenafil on brachial artery flow mediated dilatation in type 2 diabetes // Diabetes Care. - 2002. - V. 25. - № 8. - Р. 336-339.

8. Leng C., Lee AJ, Fowkers FG et al. Incidence, natural history and cardiovascular events in symptomatic and asymptomatic peripheral arterial disease in the general population. Int. J. Epidemiol. 1996; 25: 1172-8.

9. Teixeira CE, Priviero FB, Webb RC Differential effects of the phosphodiesterase type 5 inhibitors sildenafil, vardenafi l, and tadalafi l in rat aorta // J. Pharmacol. Exp. Ther. - 2006. - V. 316. - № 2. - P. 654-661.

Хронічні облітеруючі захворювання артерій нижніх кінцівок (ХОЗАНК) є однією з найбільш частих причин зниження якості життя та інвалідизації працездатного населення. Прояви цієї групи захворювань виражаються в прогресуючому зменшенні просвіту артеріальних судин, що призводить до ішемії м'язової тканини [8]. Загальна поширеність захворювань периферичних артерій в Росії варіює від 3 до 10% загальної чисельності населення [5], у всьому світі ХОЗАНК вражені 12-14% популяції, причому захворюваність зростає до 20% після 75 років [6]. Незважаючи на прогрес ангіохірургії, існує група пацієнтів, для яких можливості хірургічних та ендоваскулярних методів корекції магістрального кровотоку обмежені через неможливість адекватної реконструкції дистального судинного русла. Цим визначається інтерес, що зберігається до непрямих методів реваскуляризації [2].

В даний час існує декілька терапевтичних підходів до лікування хворих з хронічними облітеруючі захворювання нижніх кінцівок, кожне з яких має свої переваги і недоліки. Пошук оптимального методу консервативного ведення хворих з хронічною критичною ішемією нижніх кінцівок залишається досі важливою і не до кінця вирішеним завданням.

Варденафіл є селективним конкурентним інгібітором фосфодіестерази 5-го типу (ІФДЕ 5), який, перешкоджає руйнуванню циклічного гуанозинмонофосфату (цГМФ), підсилює судинорозширювальний ефект оксиду азоту (NO) [1]. Можливість ІФДЕ 5-го типу впливати на ендотелій судин показана в ряді експериментальних і плацебо-контрольованих досліджень у хворих на цукровий діабет і добровольців [7, 9]. Отримано результати, що дозволяють констатувати корекцію ендотеліальної дисфункції силденафилом і тадалафілом, що виникає при L-NAME-індукованому дефіциті оксиду азоту [4], позитивний вплив прекондиціонування силденафилом і варденафілом на стан мікроциркуляторного русла в ішемізіованной скелетної м'язі [3].

Метою цього дослідження було вивчення фармакологічної ефективності варденафілу (Левітра, Bayer) в терапії хронічної ішемії нижніх кінцівок.

Матеріали і методи дослідження

Експерименти проводилися на щурах лінії Wistar масою 230-260 г. Для дослідження взято щури без зовнішніх ознак захворювання, що пройшли карантинний режим віварію Курського державного медичного університету. Тварин розподіляли по групах (не менше 10 щурів в групі) шляхом стратифікованої рандомізації зі стратифікацією за масою тіла, умов утримання і харчування, а також по проведеним операціям і маніпуляціям. Експериментальні тварини були представлені такими групами:

1) інтактні тварини (n = 20);

2) ложнооперірованние тварини (n = 20);

3) з моделюванням ішемії м'язів гомілки (n = 20), контрольна група;

4) з моделюванням ішемії м'язів гомілки і введенням пентосіфілліна (n = 20), група порівняння;

5) з моделюванням ішемії м'язів гомілки і введенням варденафілу (n = 20), досвідчена група.

Хронічну ішемію кінцівки моделювали під наркозом, фіксувати тварина в положенні на спині. На внутрішній поверхні стегна ретельно вистригали шерсть, місце операції обробляли 70% -ним розчином спирту і здійснювали розріз шкіри вздовж стегна по внутрішній поверхні. Виділивши елементи судинно-нервового пучка, відокремлювали артерію від вени і нерва, і потім, наклавши лігатуру у місця її початку, до відходження a. saphena (під пахової зв'язкою), перев'язували і перетинали a. saphena. Виділяли підколінну артерію і початкові відділи артерій гомілки (передня і задня великогомілкової артерії) і перетинали, що не перев'язуючи. Стегнову артерію перетинали на 3 мм нижче накладеної раніше лігатури. Видаляли ділянку магістрального судини, що включає стегнову, підколінну артерію і початкові відділи передньої і задньої великогомілкової артерій. Ретроградного кровотечі не спостерігалося. Рана на стегні вшивають безперервним швом.

Виходячи з результатів, отриманих при аналізі літературних даних, можливості компенсаторного відновлення регіонарного кровообігу в застосовуваної нами моделі, як найбільш інформативні слід розглядати 28-у добу, а 21-у добу - як проміжні.

Корекцію ішемії м'язів проводили у тварин 4-ї групи внутрішньошлунковий введенням пентоксифиллина в дозі 60 мг / кг щодня протягом 28 днів, 5-ї групи - варденафілу (Левітра, Bayer) в дозі 0,9 мг / кг 1 раз на добу щодня в протягом 28 днів. Механізм дії інгібіторів фосфодіестерази-5 заснований на блокаді гідролізу циклічного гуанозинмонофосфату (цГМФ), в результаті чого концентрація цГМФ зростає, і відбувається активація цГМФ-залежної протеїнкінази з подальшим фосфорилюванням іонних каналів. Як наслідок, знижується концентрація кальцію в гладком'язових судинних клітинах, що призводить до їхньої релаксації. Інгібітори фосфодіестерази-5 сприяють розвитку вазодилатації під дією ендогенного оксиду азоту (NO), який виділяється з нервових закінчень і ендотеліальних клітин, стимулюючи синтез цГМФ за допомогою ферменту гуанілатциклази. Розслаблення гладких клітин призводить до розширення артерій, що забезпечує необхідний приплив артеріальної крові.

Рівень мікроциркуляції в м'язах гомілки визначали за допомогою обладнання виробництва компанії Biopac systems: поліграфа МР100 з модулем лазерної доплерівської флоуметріі LDF100C і інвазивного голчастого датчика TSD144 на 21-е і 28-е добу. Реєстрація та обробка результатів лазерної доплерівської флоуметріі (ЛДФ) проводилися за допомогою програми AcqKnowledge версії 3.8.1, значення мікроциркуляції виражалися в перфузійних одиницях (ПЕ). На 21-е і 28-е добу проводився висновок 50% (n = 10) жіводних з кожної групи. Уклавши наркотизовану тварина на правий бік, иссекали ділянку шкіри на переднелатеральной поверхні лівої гомілки, оголювали м'язи. Датчик встановлювали строго перпендикулярно до поверхні м'язи, виключаючи виникнення повітряного прошарку і пересихання м'язи. Рівень мікроциркуляції реєстрували в п'яти точках: середина м'язи, точки на 3-4 мм вище, нижче, латеральнее і медіальніше від першої. Запис кривої рівня мікроциркуляції проводили протягом 30 с в кожній точці. З отриманих п'яти значень розраховували середнє, вносили в протокол і брали за рівень мікроциркуляції в м'язах гомілки у даної тварини. З 10 отриманих значень розраховували середнє, яке брали за рівень мікроциркуляції в даній групі тварин на даному терміні дослідження.

Забір досліджуваного м'яза для морфологічного дослідження здійснювали після закінчення процедури ЛДФ. Для цього розсікали власну фасцію гомілки, м'яз мобілізували, відсікали від місць прикріплення, а потім фіксували в 10% -му розчині нейтрального формаліну.

Результати дослідження та їх обговорення

Для статистичної оцінки отриманих даних використовували методи параметричної статистики. Значимість відмінностей між групами визначали за допомогою t-критерію Стьюдента для залежних вибірок. Достовірними вважали відмінності між порівнюваними значеннями з рівнем значимості 95% (р <0,05).

Середнє значення рівня мікроциркуляції в интактной м'язі гомілки щурів становить 527 ± 13 ПЕ. Отриманий результат значимо не відрізняється від результатів, отриманих іншими авторами, які використовували цю модель. Під час гістологічного дослідження міоцити утворюють щільні пучки, в товщі яких проходять повнокровні венули і артеріоли, що містять одиничні еритроцити. Просвіти судин широкі, ендотеліальні клітини без патологічних змін.

У групі ложнооперірованних тварин середнє значення рівня мікроциркуляції в м'язах лівої гомілки на всіх термінах не має достовірних відмінностей від показників в групі інтактних тварин (519 ± 13 ПЕ на 21-ту добу, р = 0,66; 521 ± 16 на 28-е добу , р = 0,77). Під час гістологічного дослідження значущих відмінностей від будови інтактних м'язів не виявлено.

У групі моделювання ішемії м'язів гомілки рівень мікроциркуляції на всіх термінах достовірно нижче значень в интактной м'язі (325 ± 3 ПЕ на 21-ту добу, р <0,05; 371 ± 2 ПЕ на 28-ту добу, р <0,05) . На 21-ту добу ішемії уражена м'яз макроскопически виглядала набряклою з великими ділянками сірувато-коричневого кольору. Гістологічно великі ділянки представляли собою осередки организующегося некрозу з резорбцією некротичних волокон і розростанням грануляційної тканини. На 28-ту добу м'яз виглядала гіпотрофічних, а колір м'язи наближався до нормального. Гістологічно ділянки резорбіруемой некрозу були значно менше, поблизу яких зустрічалися пучки атрофованих м'язових волокон. У мікроциркуляторному руслі спостерігалися повнокров'я і новоутворення одиничних капілярів.

У групі тварин, яких лікували пентоксифіліном, відзначалося збільшення рівня мікроциркуляції в порівнянні з контрольною групою. Пентоксифілін робить позитивний вплив на неоангіогенез, але до 28-ї доби рівень мікроциркуляції не досягає нормальних значень (353 ± 5 ПЕ на 21-ту добу, р <0,05; 415 ± 2 ПЕ на 28-ту добу, р <0, 05)

Корекція варденафілом сприяла достовірному підвищенню рівня регіонарного кровотоку в ішемізованої м'язі гомілки щурів у порівнянні з показниками в третій групі на відповідному терміні (449 ± 5 ПЕ на 21-ту добу, р <0,05; 844 ± 6 ПЕ на 28-ту добу, р <0,05). Рівень мікроциркуляції в даній групі на 21-ту добу наближався до показника в групі інтактних тварин, а на 28-ту добу значно перевершував його. Макроскопічно ішемізовані м'язи в дослідній групі на 21-е і 28-е добу експерименту не відрізнялися за кольором і виглядом від м'язів інтактних щурів. Гістологічно некротичні зміни в м'язах не виявлялися, лише в деяких ділянках зустрічалися дрібні вогнища атрофується міоцитів з проліферацією клітин; зазначалося посилене новоутворення капілярів, більш виражене на 28-ту добу експерименту.

висновок

Отримані результати дозволяють констатувати, що варденафіл здатний активувати неоангіогенез і покращувати перфузію ішемізованих м'язів. Значний антиішемічний ефект варденафіла диктує необхідність подальших експериментальних та клінічних випробувань з метою профілактики і лікування локальної ішемії в хірургії.

рецензенти:

Яцун С.М., д.м.н., професор, зав. кафедрою медико-біологічних дисциплін ФГБОУ ВПО «Курський державний університет» Міністерства освіти та науки РФ, г. Курск;

Мельчінская Е.Н., д.м.н., тягар «Курська міська клінічна лікарня швидкої медичної допомоги» Комітету охорони здоров'я Курської області, м Курськ.

бібліографічна посилання

Лавриненко К.І., Маль Г.С., Орлова А.Ю., Полякова О.В., Татаренкова І.А. ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНЕ ДОСЛІДЖЕННЯ КОРЕКЦІЇ ХРОНІЧНУ ІШЕМІЇ нижніх кінцівок варденафілом // Сучасні проблеми науки та освіти. - 2015. - № 5 .;
URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=22060 (дата звернення: 13.06.2019).

Пропонуємо вашій увазі журнали, що видаються у видавництві «Академія природознавства»

(Високий імпакт-фактор РИНЦ, тематика журналів охоплює всі наукові напрямки)