ЛІНІМЕНТ пятілістнік чагарникових при ранах НА ТЛІ цукрового діабету

1. бібліографічна посилання

1 Хітріхеев В.Є. 1 Гармаев Б.Н. 2 Бальхаев М.І. 1 Миколаєва І.Г. 2

1 ФГБОУ ВПО «Бурятський державний університет» Міністерства освіти і науки РФ

2 ФГБНУ «Інститут загальної та експериментальної біології СО РАН»

Метою дослідження було виявити вплив лініменту пятілістнік чагарникового, виготовленого на апараті NanoDeBee30, на перекисне окислення ліпідів при ранового процесу у щурів з експериментальним цукровим діабетом. Експерименти проводили на білих щурах-самцях лінії Wistar; експериментальний цукровий діабет викликали одноразовим введенням аллоксана внутрибрюшинно в дозі 100 мг / кг, пошкодження шкіри відтворювалося шляхом нанесення площинних ран розмірами 2,0 х 2,0 см. На рани тварин першої дослідної групи протягом 14 діб накладалися 100 мг 5% лініменту пятілістнік чагарникового , виготовленого на апараті NanoDeBee30. У другій дослідній групі використовували препарат порівняння - лінімент бальзамічний, в контрольній групі обробку ран виробляли гліцерин-ланолінової маззю. На 7, 14 і 21 добу експерименту в сироватці крові визначали концентрацію ТБК-активних продуктів для оцінки інтенсивності процесів перекисного окислення ліпідів і вміст відновленого глутатіону та активності каталази для визначення антиоксидантного статусу. Результати дослідів свідчать про ефективне позитивний вплив лініменту пятілістнік чагарникового на загоєння ран на тлі експериментального цукрового діабету у щурів.

цукровий діабет

раневое пошкодження шкіри

перекисне окислення ліпідів

лінімент пятілістнік чагарникового

1. Єфімов А.С., Науменко В.Г. Перекисне окислення ліпідів в еритроцитах хворих на цукровий діабет з діабетичними ангіопатіями // Пробл. Ендокрінол. - 1985. - № 1. -С.6-9.

2. Королюк М.А., Іванова Л.І., Майорова І.Г. Метод визначення активності каталази // Лаб. справа. - 1988. - № 6. - C.16-19.

3. Клінічна ендокринологія. Керівництво / Н. Т. Старкова. - 3-е изд., Перераб. і доп. - СПб .: Пітер, 2002. - 576 с.

4. Методи біохімічних досліджень / під ред. М.І. Прохорова. - Л., 1982. - 272 с. Миколаєва І.Г., Хобракова В.Б., Арьяева М.М. Пятілістнік чагарниковий. - Улан-Уде, 2001. - 110с.

5. Керівництво по проведенню доклінічних досліджень лікарських засобів / голова ред. колегії А.Н. Миронов. - М., 2012. - 944с.

6. Сергієнко В.І., Бондарева І.Б. Математична статистика в клінічних дослідженнях. - М., 2006. - 256с.

7. Сталева І.Д., Гарішвілі Т.Г. Метод визначення малонового діальдегіду за допомогою ТБК // Сучасні методи біохімії. - М., 1977. - С.66-68.

8. Anderson T. Omeprazole drug interaction studies // Clin. Pharmacokinet. 1991. V.21. № 38. 1603p.

9. Fogelman AM, Berliner JA, Navab M. et al., Malondialdehyde alteration of LDL leads to cholesterol ester accumulation in human monocytes / macrophages // Proc Natl AcadSci USA. - 1980. - Vol. 77. - P. 2214-2218.

Цукровий діабет - розповсюджене захворювання [3]. Багато аспектів фармакотерапії цього складного в патогенетичному відношенні захворювання знаходяться на стадії дозволу. Ведучий синдром при цукровому діабеті - хронічна гіперглікемія, що призводить до порушення обмінів речовин, розвитку судинних ускладнень на тлі окисного стресу [3,9]. Порушення обміну глюкози в умовах дефіциту інсуліну та інсулінорезистентності тканин, а також ішемія і гіпоксія, характерні для цукрового діабету, є факторами, що сприяють підвищеного утворення вільних радикалів і їх метаболітів [1]. Антиоксидантна система організму, що включає безліч компонентів, дозволяє досить успішно протистояти безконтрольного збільшення вільних радикалів. Як показує клінічний досвід і результати досліджень, застосування антиоксидантів дозволяє нормалізувати процеси перекисного окислення ліпідів і блокувати цитотоксичну дію останніх. Існує чітко виражений взаємозв'язок між показниками перекисного окислення ліпідів і системою гомеостазу, порушення в яких сприяють розвитку ангіопатій [1]. Розлади мікроциркуляції на тлі мікро- і макроангіопатії, зниження місцевого імунітету у хворих з цукровим діабетом призводять до розвитку важких ускладнень, таких як діабетична стопа, порушення репаративних процесів при пошкодженнях шкірного покриву і слизових [3]. Тому фармакотерапія раневого процесу у хворих на цукровий діабет вимагає не тільки корекції рівня цукру в крові, а й активного місцевого впливу на рановий дефект з метою поліпшення умов для загоєння рани. Раніше проведені дослідження екстракту пятілістнік чагарникового дозволили виявити значну насиченість даного рослини біологічно активними речовинами, і перш за все, флавоноїдами, дубильними речовинами, полісахариди, вітаміни, вуглеводами, амінокислотами, сапоніни трітерпеноідной групи і іншими сполуками [5]. Наявність в складі екстракту зазначених біологічно активних речовин, які є природними антиоксидантами, а також відомості народної медицини про успішне застосування пагонів пятілістнік чагарникового при ранах [5] послужили підставою для розробки м'якої готової форми з пятілістнік чагарникового для місцевого застосування при лікуванні ран.

Мета дослідження: оцінити вплив лініменту з екстракту пагонів пятілістнік чагарникового, виготовленого на апараті NanoDeBee30, на перекисне окислення ліпідів (ПОЛ) при ранового процесу у щурів з експериментальним цукровим діабетом.

Методи дослідження: експерименти проводили на білих щурах-самцях лінії Wistar з вихідної масою 200-250 г., відповідно до вимог наказу №267 МОЗ РФ від 19.06.2003 р Протокол дослідження схвалений комісією з етики при інституті загальної та експериментальної біології СО РАН (висновок за №17 від 09.07.15 р). Тварини перебували в стандартних умовах утримання та годівлі в віварії (Наказ МОЗ №1179 від 10.10.1983 р). Досліди на тваринах здійснювалися відповідно до «Правилами Європейської конвенції із захисту хребетних тварин, що використовуються для експериментальних та інших наукових цілей». Експериментальний цукровий діабет викликали одноразовим введенням аллоксана, внутрибрюшинно, в дозі 100 мг / кг [5], а через 2 доби відтворювалося пошкодження шкіри шляхом нанесення площинних ран розмірами 2,0 х 2,0 см. На рани тварин першої дослідної групи 1 раз в добу протягом 14 діб накладалися 100 мг 5% лініменту з пагонів пятілістнік чагарникового, виготовленого на апараті NanoDeBee 30. у другій дослідній групі використовували в зазначеній дозі і схемі препарат порівняння - лінімент бальзамічний (за Вишневським), а в контрольній груп обробку ран виробляли гліцерин-ланолінової (2: 3) маззю. На 7, 14 і 21 добу експерименту у щурів визначали концентрацію ТБК-активних продуктів у сироватці крові [7,4] для оцінки інтенсивності процесів перекисного окислення ліпідів, а вміст у сироватці крові відновленого глутатіону та активності каталази - для визначення стану антиоксидантного статусу [2 ]. В грануляційної-фибринозной тканини визначали вміст нуклеїнових кислот по Шмідту і Тангаузеру в модифікації М.Р. Трудолюбове [5]. Значимість відмінностей за вказаними параметрами між досвідченими і контрольною групами тварин оцінювали за допомогою непараметричного U-критерію Манна - Уітні, відмінності вважали значущими при Р <0,05 [6].

Результати та їх обговорення

Результати досліджень показали, що щоденне нанесення на площинну рану лініменту, виготовленого на апараті NanoDeBee30, у щурів з цукровим діабетом дозволяє знизити інтенсивність ПОЛ та підвищити показники антиоксидантного статусу.

Таблиця 1

Вплив лініменту з пагонів пятілістнік чагарникового і лініменту бальзамічного на стан вільнорадикальних процесів при раневом пошкодженні шкіри у щурів з цукровим діабетом

показники,

од. виміру

Групи тварин

Гліцерин-валеліновая основа мазі- (контроль)

(N = 8)

Лінімент пятілістнік чагарникового, вироблений на апараті NanoDeBee30 (n = 10)

Лінімент пятілістнік кустарніковго, виготовленого з аптечної технології (n = 8)

7-у добу експерименту

ТБК-активні продукти, мкмоль / л

15,11 ± 0,79

9,08 ± 0,28 *

9,50 ± 0,55 *

Каталаза, кат / л

7,93 ± 0,10

8,45 ± 0,17 *

8,87 ± 0,10 *

GSH, ммоль / л

1,34 ± 0,08

1,96 ± 0,02 *

1,76 ± 0,11 *

14-у добу експерименту

ТБК-активні продукти, мкмоль / л

8,41 ± 0,10

7,83 ± 0,11 *

8,04 ± 0,75

Каталаза, кат / л

7,88 ± 0,15

9,44 ± 0,17 *

9,49 ± 0,11 *

GSH, ммоль / л

2,31 ± 0,20

3,54 ± 0,08 *

2,63 ± 0,11

21-у добу експерименту

ТБК-активні продукти, мкмоль / л

8,98 ± 0,66

5,78 ± 0,53 *

6,61 ± 0,46 *

Каталаза, кат / л

12,32 ± 0,05

15,00 ± 0,59 *

12,42 ± 0,63

GSH, ммоль / л

3,33 ± 0,22

4,29 ± 0,24 *

3,87 ± 0,23

Дані, представлені в таблиці 1, показують, що на тлі застосування лініменту пятілістнік чагарникового рівень ТБК-активних продуктів на 7 добу знижується на 39,93% і становить 9,08 мкмоль / л; на 14 добу до 7,83 мкмоль / л, а на 21 добу - на 36,34%. Паралельно відзначається підвищення показників антиоксидантного статусу. Так активність каталази в сироватці крові щурів зростає на тлі застосування зазначеного кошти. Рівні приросту зазначеного ферменту склали - 11,71% і 58,83%. Зміст відновленого глутатіону підвищився на 86,78% на 14 добу, а 21 добу - на 215,44. Надмірне утворення продуктів перекисного окислення ліпідів, характерне в першу фазу ранового процесу, на тлі застосування лініменту пятілістнік чагарникового ефективно стримується завдяки впливу біологічно активних речовин, зокрема флавоноїдів та інших сполук, що містяться в діючій речовині використовуваного кошти, зі значним підвищенням активності каталази та рівня відновленого глутатіону. Ефекти препарату порівняння - лініменту бальзамічного були менш виражені, на порядок менше. З цими даними узгоджуються і показники антиоксидантного статусу в даній групі щурів: активність каталази в сироватці наростає повільними темпами, вміст відновленого глутатіону на тлі застосування лініменту по Вишневському мало змінювалося в наших дослідах. Очевидно, що високореактівние сполуки, що є продуктами ПОЛ, викликають не тільки пряме цитотоксичну дію на підшлункову залозу, а й запускають механізми пошкодження судинної системи, що має прямий негативний ефект при загоєнні ран у тварин з цукровим діабетом. Істотна роль активації ПОЛ в патогенезі цукрового діабету підтверджується сприятливим ефектом антиоксидантних препаратів на процеси ранозажівленія. Прискорене загоєння ранових дефектів на тлі лініменту пятілістнік чагарникового обумовлена ​​стимуляцією синтетичної активності клітин і клітинної чисельності в зоні ранового ушкодження (табл. 2). Так, на тлі застосування зазначених линиментов підвищується синтетична активність клітин і їх чисельність, що свідчить про стимуляцію ними регенераційних процесів на тлі пригнічення вільнорадикальних реакцій при пошкодженні шкіри.

Таблиця 2

Вплив лініменту пятілістнік чагарникового на синтетичну активність клітин при раневом пошкодженні шкіри у щурів з цукровим діабетом (14 доба)

препарат

РНК

ДНК

Лінімент пятілістнік чагарникового, вироблений на апараті NanoDeBee30

0.892 + 0.03 *

0.914 + 0.02 *

Лінімент бальзамічний за Вишневським

0.681 + 0.02 *

0.707 + 0.03 *

Вазелін-гліцеринова основа мазі- (контроль)

0.658 + 0.01

0.731 + 0.01

З представлених даних випливає, що на тлі застосування лініменту пятілістнік чагарникового значимо активується синтетична активність клітин в зоні пошкодження. Очевидно, що завдяки такій високій активності синтетичних процесів прискорюються процеси ранозажівленія у щурів з цукровим діабетом. Безумовно, малі розміри екстрактивних речовин і однорідність, що досягаються при гомогенізації, підвищують біодоступність біологічно активних речовин і тим самим прискорюють репаративні процеси. Безумовно, що цей біофармацевтичний фактор відіграє вагому роль в досягненні фармакотерапевтического ефекту.

Таким чином, при використанні мазі пятілістнік чагарникового відзначається форсування процесу ранозажівленія у тварин з експериментальним цукровим діабетом, при цьому завдяки достовірної інтенсифікації синтезу нуклеїнових кислот і підвищення антиоксидантного статусу ефективно долаються негативні наслідки порушень обміну речовин і торпідний перебіг ранового процесу на тлі цукрового діабету. У зв'язку з цим подальші розробки в цьому напрямі дозволять розвивати фармакотерапевтичні стратегії з урахуванням «фармацевтичних факторів» проти цитотоксичності продуктів перекисного окислення ліпідів з обґрунтуванням застосування антиоксидантних засобів місцевої дії, стимуляторів регенерації при ранових ушкодженнях шкіри у хворих на цукровий діабет. У зв'язку з цим подальші розробки в цьому напрямі дозволять розвивати фармакотерапевтичні стратегії проти цитотоксичності продуктів перекисного окислення ліпідів [8] з обґрунтуванням перспективи застосування антиоксидантних засобів місцевої дії при ранових ушкодженнях шкіри у хворих на цукровий діабет.

бібліографічна посилання

Хітріхеев В.Є., Гармаев Б.М., Бальхаев М.І., Миколаєва І.Г. ЛІНІМЕНТ пятілістнік чагарникових при ранах НА ТЛІ цукрового діабету // Сучасні проблеми науки та освіти. - 2016. - № 5 .;
URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=25119 (дата звернення: 05.07.2019).

Пропонуємо вашій увазі журнали, що видаються у видавництві «Академія природознавства»

(Високий імпакт-фактор РИНЦ, тематика журналів охоплює всі наукові напрямки)