РОЛЬ нейроглії У морфогенезі ПРОЗОРИХ СТРУКТУР ОЧІ ЛЮДИНИ

1. бібліографічна ПОСИЛАННЯ

1 Рева І.В. 1 Ямамото Т.Т. 2 Лемешко Т.Н. 1 Олексенко О.М. 1 Гулько О.М. 3 Альбрандт К.Ф. 3 Можілевская Е.С. 1, 3 Балдаев С.Н. 1 Індик М.В. 1 Ніколаєнко Г.А. 1 Рева Г.В. 1, 3

1 Далекосхідний федеральний університет, Школа біомедицини

2 Міжнародний медичний науково-освітній центр

3 Далекосхідний федеральний університет, Інженерна школа

В роботі за допомогою класичного гістологічного дослідження з фарбуванням гематоксиліном та еозином, а також иммуногистохимического методу на виявлення білка гена S100В проаналізовано матеріал ембріонів і плодів людини, отриманий при штучних переривання вагітності. Досліджено локалізація білка S100В, що є маркером нейроглії, з метою виявлення джерел розвитку прозорих середовищ ока людини. За допомогою білка S100В встановлено, що клітини нейроглії виявляються починаючи з ембріонального періоду в стромі рогівки, в склоподібному тілі, кришталику, беспигментной епітелії і клітинах, які формують мембрану Бруха. Встановлено, що в структурах прозорих середовищ, що беруть участь в трофическом забезпеченні сітківки ока людини, ідентифікація S100В відбувається починаючи з ембріонального періоду, на відміну від сітківки, в якій маркер визначається починаючи з 30-го тижня - в плодовий період. Це свідчить про те, що диференціювання і спеціалізація астроцитів відбуваються раніше в прозорих середовищах, ніж в сітківці. Отримано незаперечні докази участі нейрогліальних мігрантів у формуванні прозорих середовищ ока.

s100в

астроглії

нейроглії

скловидне тіло

кришталик

рогівка

морфогенез очі людини

1. Bluhm B., Laffer B., Hirnet D., et al. Normal cerebellar development in S100B-deficient mice // Cerebellum. 2015. V. 14 (2). P. 119-127.

2. Cavallaro M., Mariani J., Lancini C., et al. Impaired generation of mature neurons by neural stem cells from hypomorphic Sox2 mutants // Development. 2008. V. 135 (3). P. 541-557.

3. Chen Y., Huang K., Nakatsu MN, et al. Identification of novel molecular markers through transcriptomic analysis in human fetal and adult corneal endothelial cells // Hum. Mol. Genet. 2013. V. 22 (7). P. 1271-1279.

4. Chong RS, Martin KR Glial cell interactions and glaucoma // Curr. Opin. Ophthalmol. 2015. V. 26 (2). P. 73-77.

5. Davydov DM, Lobanov AV, Morozov SG, et al. Neurodevelopment and phenotype-modulating functions of S100B protein: A pilot study // Journal: Physiology & Behavior. 2015. V. 140. P. 188.

6. Hendrickson A., Yan YH, Erickson A. et al. Expression patterns of calretinin, calbindin and parvalbumin and their colocalization in neurons during development of Macaca monkey retina // Exp. Eye Res. 2007. V. 85 (5). P. 587-601.

7. Goldman D. Müller glial cell reprogramming and retina regeneration // Nat. Rev. Neurosci. 2014. V. 15 (7). P. 431-442.

8. Guduric-Fuchs J, Ringland LJ, Gu P., et al. Immunohistochemical study of pig retinal development // Mol. Vis. 2009. V. 15. P. 1915-1928.

9. Jayaram H., Jones MF, Eastlake K., et al. Transplantation of photoreceptors derived from human Muller glia restore rod function in the P23H rat // Stem. Cells Transl. Med. 2014. V. 3 (3). P. 323-333.

10. Joseph R., Srivastava OP, Pfister RR Differential epithelial and stromal protein profiles in keratoconus and normal human corneas // Exp. Eye Res. 2011. V. 92 (4). P. 282-298.

11. Kim SN, Jeibmann A., Halama K., et al. ECM stiffness regulates glial migration in Drosophila and mammalian glioma models // Development. 2014. V. 141 (16). P. 3233-3242.

12. Matteucci A., Gaddini L., Macchia G., et al. Developmental expression of dysbindin in Muller cells of rat retina \\ Exp. Eye Res. 2013. V. 116. P. 1-8.

13. Matas A., Filipovic N., Znaor L., et al. Interplay of proliferation and differentiation factors is revealed in the early human eye development // Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 2015. V. 253 (12). P. 2187-2201.

14. Porter LF, Gallego-Pinazo R., Keeling CL, et al. Bruch's membrane abnormalities in PRDM5-related brittle cornea syndrome // Orphanet. J. Rare Dis. 2015. V. 10. P. 45.

15. Reichenbach A., Bringmann A. New functions of Müller cells // Glia. 2013. V. 61 (5). P. 651-678.

16. Reva GV, Kovaleva IV, Reva IV, et al. Role of the neuroglia of human ocular transparent structures in the visual perception concepts // Bull. Exp. Biol. Med. 2013. V. 154 (4). P. 515-520.

17. Sakimoto S., Kidoya H., Naito H., et al. A role for endothelial cells in promoting the maturation of astrocytes through the apelin / APJ system in mice // Development. 2012. V. 139 (7). P. 1327-1335.

18. Tao C., Zhang X. Development of astrocytes in the vertebrate eye // Dev. Dyn. 2014. V. 243 (12). P. 1501-1510.

19. Tikhonovich MV, Iojleva EJ, Gavrilova SA Тhe role of inflammation in the development of proliferative vitreoretinopathy // Klin. Med. (Mosk). 2015. V. 93 (7). P. 14-20.

20. Zagozewski JL, Zhang Q., Eisenstat DD Genetic regulation of vertebrate eye development // Clin. Genet. 2014. V. 86 (5). P. 453-460.

21. Yamagami T., Stokes A., Nguyen BC, et al. Pax6 mediates ß-catenin signaling for self-renewal and neurogenesis by neocortical radial glial stem cells // Stem Cells. 2014. V. 32 (1). P. 45-58.

22. Yip HK Retinal stem cells and regeneration of vision system // Anat. Rec. (Hoboken). 2014. V. 297 (1). P. 137-160.

Актуальність. Концепції на основі правильних уявлень про джерела і механізми розвитку очі є головною теоретичною базою для отримання з плюрипотентних стовбурових індукованих клітин із заданою програмою розвитку для створення і забезпечення необмеженого джерела в клітинної замісної терапії в офтальмології [20]. Відсутність чіткого розуміння механізмів морфогенезу структур очі людини, дискусії з приводу джерел розвитку та остаточної структури прозорих середовищ, патогенетично необгрунтоване лікування при зниженні прозорості середовищ очі і, як наслідок, втрата зорових функцій є яскравим відображенням актуальності досліджень в цьому напрямку. На сучасному етапі предметом гострих дискусій залишаються питання, як різні типи клітин, що формують структури очі, відрізняються від їх попередників і які чинники координують комплексний розвиток очей людини [5, 13]. Правильна диференціація фоторецепторів представляє особливий інтерес через їх участі у виникненні дегенеративних захворювань сітківки ока [1]. Портером з співавторами (Porter LF et al., 2015) встановлено поєднане пошкодження мембрани Бруха, що має генералізований характер, з порушеннями в стромі і епітелії рогівки [14]. Встановлено гени, відповідальні за цю патологію. Але залишилися невідомими фактори, що впливають на експресію генів, що свідчить про недостатність молекулярно-генетичних даних, отриманих в експериментах на комах і нижчих хребетних [8]. Відсутність повних уявлень по морфогенезу очі людини на тлі численних молекулярно-генетичних досліджень на моделях безхребетних і нижчих хребетних диктує отримання більш глибоких уявлень про фізіологічної регенерації структур очі людини для правильної інтерпретації і індукції репаративних регенераторних процесів за допомогою лікувальних заходів. М.В. Тихонович та ін. (Tikhonovich MV et al., 2015) вважають фактором ризику в розвитку патології очі залучення пігментних епітеліальних клітин, макрофагів, гіалоцітов, глиоцитов, клітин Мюллера, медіаторів запалення, таких як цитокіни, хемокінів і фактори росту, враховуючи їх взаємодію в процесах проліферації і розвитку мембран сітківки ока [19]. Сучасні методи лікування катаракти, неоваскуляризации прозорих середовищ ока, вікової макулодистрофії і глаукоми отримають фундаментальну платформу на основі нових даних щодо розвитку очі людини. За даними А. Маттеуці c cоавторамі (Matteucci A. et al., 2013), які виявили в клітинах Мюллера дісбіндін, продукт гена DTNBP1, підтверджується можливе функціональне участь цього білка в візуальних змінах, пов'язаних з нервово-психічними розладами [12]. Відомо, що в сітківці нейрони і глия генеруються в консервативному порядку з пулу мультіпотентних клітин-попередників. На думку Х. Їп (Yip HK, 2014 року), в ході розвитку стовбурові прогеніторні ретинальні клітини (RPC) змінюють експресію геному з плином часу під впливом внутрішніх транскрипційних і зовнішніх чинників, таких як фактори росту, проте зберігаючи потенції стовбурових в мюллерових клітинах [22]. Незважаючи на підтверджені факти істотної ролі β-катенінзавісімого сигнального шляху Wnt, що контролює програми генної експресії і пов'язаного з напрямком морфогенезу, Т. Ямага і ін. (Yamagami T. et al., 2014 року) показано, що, хоча сигналізація ß-катенин / Pax6 відіграє вирішальну роль в самооновлення і нейрогенез радіальних гліальних клітин, індукція Wnt сигналізації в радіальної глії, обеспечивающаяся міжклітинними взаємодіями, залишається тим не менше практично не вивченою [21]. На думку Х. Джером з співавторами (Jayaram H. et al., 2014 року), Мюллерова глия з характеристиками стовбурових клітин (hMSCs) може придбати фенотипічні і генотипические ознаки стрижневих фоторецепторів поки тільки в пробірці [9], а для того, щоб ці дані інтерпретувати на організм людини, необхідно мати дуже чітке уявлення про розвиток очі людини, диференційовано використовуючи молекулярно-генетичні дані, отримані на мушці-дрозофілі.

Догма про єдиному джерелі розвитку кришталика повинна бути спростована для правильного застосування нових даних в клітинних технологіях. Нова ера лікування очної патології пов'язана з виходом з тупикових уявлень про джерела розвитку очі, встановленням природи клітин, що формують прозорі середовища ока, а також виявленням їх в структурі органу зору зі створенням нових патогенетично обґрунтованих методів лікування, що і визначило напрямок наших досліджень.

Метою нашого дослідження є вивчення загальних закономірностей розвитку очі людини.

Завдання дослідження

1. Встановити особливості розвитку очі людини в ранньому ембріональному періоді.

2. Вивчити локалізацію та час ідентифікації клітин, які мають рецептори на маркери S100В в прозорих середовищах очі людини.

3. Дати характеристику особливостей активності гена білка S100В в тканини формуються прозорих середовищ ока людини.

Матеріал і методи. З дозволу Етичного комітету ДВФУ, відповідно до Гельсінською декларацією, за клінічними показаннями і з інформованої згоди пацієнтів проведений забір матеріалу при штучних переривання вагітності за соціальними показниками (табл. 1).

Таблиця 1

Розподіл матеріалу очі ембріонів і плодів людини

періоди розвитку

ембріони

Плоди

термін розвитку

до 6 тижнів

до 12 тижнів

до 30 тижнів

до 40 тижнів

кількість

16

7

8

12

Імуногістохімічними методами для уніфікації оцінки процесів морфогенезу виявляли S100В-позитивні клітини, проаналізували їх кількісні співвідношення, а також виявили особливості їх розподілу в структурах розвивається очі людини. Аналіз результатів проведено за допомогою мікроскопа Olympus BX51, ілюстрації отримані за допомогою цифрової камери DP 25, статистична обробка досліджуваного матеріалу зроблена за допомогою фірмових комп'ютерних програм виробництва компанії Olympus.

Результати. Встановлено, що в ранньому ембріогенезі людини до 6 тижнів формується очна чаша, первинний очної бульбашка зменшується, задня стінка чаші представлена ​​пігментним епітелієм, в якому ідентифікуються яскраво-базофільні ядра, розташовані в базальної частини клітин. Гранули пігменту зосереджені в апікальній частині цитоплазми. Внутрішня стінка очної чаші (або келиха) представлена ​​формується сітківкою, що має неоднакову будову на задній поверхні очного келиха і в місці переходу в пігментний епітелій (рис. 1). Найменша товщина формується сітківки відповідає краях очного келиха, місця переходу сітківки в пігментний епітелій. Внутрішня задня стінка очної чаші має латеральні звуження, при цьому в місці переходу в бічні стінки знову розширюється, утворюючи густу масу ядер. Сітківка в місці переходу в пігментний листок представлена ​​2-3 шарами клітин, утворюючи потовщення в області численних випинань пігментного листка, відповідного місця формування відростків циліарного тіла. Задня нейтральні стінка очного келиха має складну будову і представлена ​​численними густими шарами клітин з яскраво-базофільними ядрами, що розташовуються дистально, а проксимально розташовується шар з рідко розташованими клітинами з хромофобная цитоплазмой, що свідчить про їх прогеніторних функції і приналежності до спонгіобластов. Сітківка з двох сторін оточена гомогенними мембранами, освіченими астрогліей, яка, як і весь внутрішній шар, характеризується слабкою експресією на білок S100. У цей період, на етапі формування кришталикової плакоди, в ній не ідентифікуються клітини, що містять в цитоплазмі білок S100. Фіброзна оболонка має неоднорідне будову в області переходу зачатка рогівки в склеру, яка, хоча і представляє загальний зачаток із судинною оболонкою, але має менш щільну структуру.

До кінця 6-го тижня спостерігається повне закриття первинної очної щілини, виключаючи простір навколо зорового нерва. Кришталик набуває складну будову, кришталикових бульбашка інвагініруют на задній поверхні, поступово формуючи кришталикових серп.

Мал. 1. Око ембріона людини 6 тижнів (вага 25 г)

Ідентифікуються очної келих із залишками первинної очної щілини, кришталика плакода, поєднана з ектомезенхімой зачатка зовнішньої оболонки. Фіброзна оболонка має однакову будову в області зачатка рогівки без переходу в склеру, яка представляє загальний зачаток із судинною оболонкою. Усередині залишків первинного очного міхура, в зоні формується рогівки і мембрани Бруха ідентифікуються нейрогліальні клітини S100 (вказані зірочками). Імунна гистохимія. Локалізація S100. Ув.х100. 1) залишки первинного очного бульбашки; 2) вторинний очної міхур; х - кришталик; Ст) склоподібне тіло; СС) загальний зачаток фіброзної і судинної оболонки; С) нейтральні сітківка; П) пігментний епітелій; Е) ектодерма; Зн) зоровий стеблинка.

Всередину вторинного очного міхура вростає ектодермальна плакода, оточена шаром плоских клітин на периферії. Судинна і фіброзна оболонка на цьому етапі є загальний зачаток, без ідентифікації місця переходу склери в рогівку.

Найбільші скупчення нейроглії, що містить S100, спостерігаються всередині залишків первинного очного міхура, а також в зоні переходу сітківки в пігментний листок (рис. 2).

Мал. 2. Око ембріона людини 12 тижнів (вага 75 г)

А) загальний план будови ока; б, в) збільшені фрагменти капсули кришталика і склоподібного тіла. Ідентифікуються кришталикових бульбашка, залишки первинного очного міхура, розташовані латерально, склоподібне тіло, заповнені астрогліей зі слабкою експресією на білок S100 (вказані зірочками). Імунна гистохимія. Локалізація S100. А) Ув.Х100; Б, В) ув. Х400.

На поверхні кришталикових епітелію ідентифікується шар клітин, який, як ми припускаємо, має нейрогліальних природу і який зберігається в наступний період розвитку, пов'язаний з волокноутворення в кришталику (рис. 3).

Мал. 3. Око плода людини 14 тижнів. Формування передньої камери ока. Імунна гистохимія з докраской гематоксилином. збільшення Х400

На передній поверхні капсули кришталика ідентифікується астрогліальная мембрана, яка зберігається на задній поверхні кришталика до кінця плодового періоду онтогенезу.

У цей період рогівка складається із зовнішнього переднього 2-шарового епітелію, а також однослойного заднього ендотелію, які проявляють слабку експресію на білок S100, що знаходиться у відповідності з літературними даними про його значення в трофическом забезпеченні розвиваються і проліферуючих клітин [3]. В стромі рогівки кількість клітин, що реагують на маркери S100, зменшується, як ми припускаємо, в зв'язку з диференціюванням і нової репресією генів. Усередині кришталикових бульбашки виявляються клітини, що мають веретеновидную форму і цитоплазматичні рецептори на білок S100.

У наших дослідженнях виявлення білка S100 в сітківці виявлено з 14-го тижня ембріогенезу, раніше, ніж в роботах інших авторів, ідентифікували ретинального нейроглії S100 тільки з 30-го тижня пренатального онтогенезу (рис. 4).

Мал. 4. Око людини 14 тижнів (вага 125 г). Локалізація S100 в структурах ока. Імунна гистохимія. Ув. Х 100

Це може бути пов'язано з тим, що функціональний запит в прозорих середовищах очі настає раніше у зв'язку з їх роллю в трофическом забезпеченні сітківки в умовах фізіологічної регенерації, а також сигнальних взаємодій клітин в умовах формування векторів напрямку росту кровоносних судин і їх пригнічення в напрямку прозорих середовищ очі.

Також це пояснює загальну для нейроглії сітківки і мозку, гіалоцітов склоподібного тіла і клітин кришталика здатність секретувати Кристалін.

У наступний, більш пізній період розвитку очі, кришталикових бульбашка заповнюється волокнами, які мають походження нейрогліальних, а не епітеліальне, як передбачалося раніше.

Таким чином, виявлені нами в структурах розвивається очі нейрогліальні клітини, експресувати маркерами на білок S100, свідчать про участь нейроглії в формуванні прозорих середовищ ока людини.

Обговорення. S100 Білки складають найбільшу підгрупу так званні EF-hand-кальційзв'язуючій білків (за структурою кальційзв'язуючій ділянки: спіраль E - петля - спіраль F), до якіх, для прикладу, відносяться такоже кальмодулин и тропонин С. S100 Білки могут формуваті як гомо-, так и гетеродімері, кроме Ca2 +, пов'язувати такоже Zn2 + і Сu2 +. Захоплення іонів змінює просторово організацію S100 Білка и Забезпечує можлівість зв'язку з різнімі білкамі-мішенямі їх біологічної Дії, при цьом документовано понад 90 потенційніх білків-мішеней).
Представник S100 білків демонструють вираженість тканин і клітінну спеціфічну експресію. Смороду залучені в Різні процеси - СКОРОЧЕННЯ, рухлівість, клітінній ріст и діференціацію, прогресію клітінного циклу, транскріпцію, клітінну організацію мембран и дінаміку цитоскелета, захист від оксидативного пошкодженню Клітини, фосфорилювання, секрецію. З Огляду на факт того, что S100 Білки віконують як внутрішньоклітінні, так и позаклітінні Функції, в разі секреції смороду діють аналогічно цитокинам. Вивчений нами нейрогліальних S100В, який продукується переважно астроцитами нервової тканини, є маркером активації астроглії, опосредующим свої ефекти через взаємодію з RAGE (receptor for advanced glycation end products - рецептори кінцевих продуктів глікозилювання). На основі літературних даних можна вважати, що S100 не тільки виявляє нейротрофічних активність, але і сприяє міграції та спеціалізації ефекторних клітинних диферонів в прозорих структурах очі людини. S100-RAGE взаємодія грає важливу роль в морфогенезі прозорих середовищ ока людини.

На думку С. Cакімото з співавторами (Sakimoto S. Et al., 2012), взаємодія між астроцитами і ендотеліальними клітинами (ЕКС) має вирішальне значення для формування судин сітківки [17]. Астроцити індукують міграцію і проліферацію ЕКС за допомогою секреції фактора росту ендотелію судин (VEGF), і навпаки, ЕКС індукують дозрівання астроцитів, яке індукує ангіогенез. Саме тому в сітківці, в якій ангіогенез починається з 14-го тижня пренатального онтогенезу, не виявляються ефекторні нейрогліоціти S100. Наші оригінальні дані про нові функції астрогліальних клітин Мюллера як оптичних волокнах, які регулюють і спрямовують світлові імпульси через внутрішню тканину сітківки, збільшуючи сигнал за рахунок мінімізації внутріретінального розсіювання світла, зберігаючи просторовий розподіл імпульсів [16], знайшли підтвердження в дослідженнях А. Рейхенбаха з співавторами (Reichenbach A. et al., 2013) [15]. За нашими даними, мюллерівський астроглії (Мк) в пренатальному онтогенезі служить не тільки в якості м'якого субстрату, що необхідно для зростання аксонів і нейрональної пластичності, а й виселяється в структури прозорих середовищ ока для забезпечення в постнатальному онтогенезі зорових функцій, а також контролю і обмеження проростання судин в рамках строгих векторів. Саме в зв'язку з поліфункціональність нейроглії, за нашими даними і думку Р.С. Чонг і К.Р. Мартіна (Chong RS, Martin KR, 2015) [4], вона відіграє важливу роль в патогенезі глаукоми, проявляючись в генералізованому ураженні сітківки і прозорих структур очі.

Д. Голдман (Goldman D., 2014 року) показано, що у костистих риб (даніо (лат. Danio)) реакція астроглії на пошкодження сітківки супроводжується перепрограмуванням в стовбурові клітини і дозволяє їм виробляти пролиферирующую популяцію клітин-попередників, які можуть регенерувати всі основні типи клітин сітківки ока з відновленням зорової функції [7]. С. Кім зі співавторами (Kim SN et al., 2014 року) відзначають, що мігруючі гліальні клітини зберігають мітогеном і рухливі властивості при інтенсивному взаємодії з позаклітинної середовищем, міграція супроводжується експресією генів, що відповідають за спеціалізацію клітин, але при цьому диференціація контролюється послідовної активацією рецептора фактора росту фібробластів (FGF) [11]. М. Кавалларо з співавторами (Cavallaro M., et al., 2009) встановлено, що в сітківці надлишкова експресія Sox2 до стадії диференціювання не тільки запобігає дефект нейронного дозрівання, але і пригнічує експресію генів диференціювання в гліальних клітинах [2].

Таким чином, розвиток око є Складно регульований процес, який складається з декількох перекриваються етапів: (I) закладка, потім відокремлення очі від розвивається переднього мозку; (II) диференціювання і структурування очного бульбашки з відокремленням оболонок; (III) спеціалізація структур очного келиха в нейрональную сітківку і пігментний епітелій, формування прозорих середовищ ока; і (IV) спеціалізація і васкуляризація всіх структур ока, які розвиваються з пулу клітин-попередників, похідних ектодерми, екто- і нейромезенхіми. При цьому пріоритет у розвитку структур очі отримують саме прозорі середовища ока, в яких йдуть інволюція судин, обмеження рогівки і склери, формування мембрани Бруха для створення векторного зростання судин. Генетична регуляція етапів розвитку очей включає в себе впливи ззовні за допомогою Морфогенія, факторів росту, а також внутрішніх чинників, в першу чергу транскрипційних факторів, які взаємодіють з характерними ділянками ДНК, розташованими в регуляторних областях генів. Діючи відповідно до генетичної програмою і / або у відповідь на зовнішні впливи, вони ініціюють або пригнічують транскрипцію певних генів, що тягне за собою зміни в клітинній морфології, клітинну диференціацію, реалізуючи морфо- і органогенез.

Дослідження важливих механізмів, що лежать в основі міграції і перепрограмування мюллерівський глії в фізіологічної регенерації структур очі людини, можуть призвести до нових стратегій для стимуляції регенерації сітківки і інших структур очей при офтальмопатологіі. C. Tao і Х. Занг (Tao C, Zhang X., 2014 року) відзначають, що найбільш фундаментальні питання унікальних типів гліальних клітин, астроцитів, залишаються слабо вивченими, хоча вони представляють найбільш ранню гліальних популяцію в ембріогенезі зорового нерва, сприяють ангіогенезу в нейральной сітківці і формуванню гематоофтальміческого бар'єру [18]. За даними А. Хендріксона з співавторами (Hendrickson A. et al., 2007), досить імовірно, що кожен білок відіграє певну роль в кожному зоровому центрі і що його експресія контролюється на даному етапі розвитку сітківки декількома внутрішніми і зовнішніми факторами [6].

Огляд сучасних даних про джерела розвитку, проліферації і диференціювання астроцитів, їх міграції і ролі в фізіологічної та репаративної регенерації зорової системи, експресії генів при перепрограммировании показав, що повністю відсутні відомості про їх участь у розвитку прозорих середовищ ока людини. Наші результати дають можливість розглянути проблему катаракти і діабетичної ретинопатії з нових позицій і з урахуванням інших механізмів. Участь двох джерел розвитку кришталика пояснюють неможливість отримання лінзи за допомогою клітинних технологій, використовуючи тільки ектодермальних кришталикову плакода, яка без індукторних впливів астроглії супроводжується розвитком катаракти. Дані Р. Джозефа з співавторами (Joseph R. et al., 2011) не суперечать нашим результатам, так як ідентифіковані ними епітеліальні і стромальні білки рогівки мають відношення до секреції спеціалізованими клітинами, а не відносяться до білків, секретується за рахунок тимчасової експресії генів [ 10]. І. Чен зі співавторами (Chen Y. еt al., 2012) виявили, що S100A (S100A4, S100A5 і S100A6) мають високу концентрацію в ендотелії рогівки у дорослих, але відсутні в ембріональних рогівці [3]. А. Матас і співавтори (Matas A. et al., 2015) наголошують на важливості участі кальційзв'язуючий білка (S100), маркера проліферації (Ki-67), маркера для вій (альфа-тубуліну) і маркера клітин стовбурових клітин октамер-зв'язуючого фактора транскрипції 4 (Oct-4) в гістологічних зрізах 5-12-тижневих людських очей, в той час як у нас маркери нейроглії вперше в ембріональний період ідентифікуються в прозорих середовищах очі. У сітківці активність S100 відсутня, так як в цей час вони перебувають в репресивному стані і не виявляють активності. А. Матас і співавторами (Matas A. et al., 2015) показана експресія S100 тільки в нейтральні похідних, зоровому нерві і внутрішньому шарі нейрональної сітківки мишей і свиней, при цьому при спільній локалізації з нестін вони ідентифікуються в найбільш інтенсивний період морфогенезу очі і диференціації його структур [13]. Спочатку висока експресія S100 у всіх частинах розвивається очі поступово припиняється, особливо в зовнішньому нейтральні шарі. Проліферуючі Ki-67 позитивні клітини спільно локалізуються з нестін в сітківці, кришталику і хориоидее, при цьому можлива ингибирующая експресію індуцибельних генів роль Oct-4 полягає в запобіганні передчасної диференціювання клітин. Спільна локалізація Oct-4 і Ki-67 в Нейробласти сітківки ока, ймовірно, представлена ​​в пулі нейрональних стовбурових клітин, які в зв'язку з проліферацією ще не готові до термінальної диференціювання.

І. Чен і співавтори (Chen Y. Et al., 2012) вважають відповідальним за прозорість рогівки моношар ендотеліальних клітин (CECs), для яких Wnt і TGF-бета сигнальні шляхи є важливими в процесах диференціювання і дозрівання. При відсутності TGF- & beta у мишей спостерігається відсутність ендотелію і злиття лінзи з рогівкою. Ми вважаємо, оскільки TGF-beta виділяють багато типів клітин, включаючи макрофаги, первинним є відсутність иммуноцитов, а порушення структури вдруге.

Висновки

1. Особливості розвитку очі людини в ранньому ембріональному періоді полягають в участі нейроглії в формуванні структур прозорих середовищ ока. Виселення з нейральной сітківки з утворенням прозорих середовищ ока супроводжується дифференцировкой нейрогліоцітов раніше, ніж в сітківці.

2. Вивчення локалізації та часу ідентифікації клітин, які мають рецептори на маркери S100В в прозорих середовищах очі людини, показало, що довше зберігаються властивості стовбурових клітин у спонгіобластов сітківки.

3. Особливості активності гена білка S100В в клітинах тканин формуються прозорих середовищ ока людини пов'язані з диференціюванням і перепрограмуванням нейрогліоцітов через експресію геному в напрямку секретуючих Кристалін клітин. Рання диференціювання в прозорих структурах очі пов'язана з їх регулюючої і інгібуючої роллю в процесах ангіогенезу.

Робота виконана за підтримки наукового фонду ДВФУ, в рамках державного завдання 2014/36 від 03.02.2014 р та Міжнародного гранту ДВФУ (угода № 13-09-0602-м від 6 листопада 2013).

бібліографічна ПОСИЛАННЯ

Рева І.В., Ямамото Т.Т., Лемешко Т.Н., Олексенко О.М., Гулько О.М., Альбрандт К.Ф., Можілевская Е.С., Балдаев С.Н., Індик М .В., Ніколаєнко Г.А., Рева Г.В. РОЛЬ нейроглії У морфогенезі ПРОЗОРИХ СТРУКТУР ОЧІ ЛЮДИНИ // Сучасні проблеми науки та освіти. - 2017. - № 1 .;
URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=26003 (дата звернення: 29.07.2019).

Пропонуємо вашій увазі журнали, что видають у видавництві «Академія природознавства»

(Високий імпакт-фактор РИНЦ, тематика журналів охоплює всі наукові напрямки)