Лабораторна діагностика. Ветеринарна біохімія - - Статті

Стаття Є.Б. Бажібіной «Методичний підхід до інтерпретації результатів біохімічних досліджень» в Російському ветеринарному журналі. Дрібні домашні і дикі тварини, № 2, 2012, стор. 8-14.

Бажібіна Олена Борисівна,
лабораторія «ВЕТЕСТ», Москва, Росія

резюме

З появою на вітчизняному ринку автоматичного обладнання біохімічний аналіз сироватки крові дрібних домашніх тварин міцно увійшов в повсякденну практику ветеринарного лікаря. Сьогодні постановка діагнозу і моніторинг тварин із захворюваннями внутрішніх органів (гостра / хронічна ниркова недостатність, гепатит, панкреатит; ендокринологічні патології, порушення мінерального обміну і багато іншого) практично неможливі без біохімічного дослідження.

Якщо аналізи виконані в одній лабораторії і, що особливо важливо, якщо є можливість проконсультуватися у лікаря-лаборанта щодо інтерпретації отриманих результатів, а також впливу на них фізіологічного стану тварини, умов взяття матеріалу, транспортування і т. Д., То практикуючий лікар, як правило, не відчуває труднощів у постановці діагнозу. Однак в повсякденній практиці доводиться мати справу з пацієнтами, які надходять на прийом з цілим «послужним списком», т. Е. З результатами аналізів, виконаних в декількох лабораторіях, що розрізняються по референсним значенням (діапазони по кожному показнику, прийняті в якості норми в конкретній лабораторії ).

Як практикуючому лікарю оцінити результати біохімічного аналізу сироватки крові, виконаного в лабораторіях, оснащених різним обладнанням, що використовують різні методики? Як порівнювати референсні значення різних лабораторій і різні одиниці вимірювання біохімічних показників? Ці та інші питання розглянуті в даній статті.

загальні положення

За нашими спостереженнями, перше, на що звертають увагу лікарі, оцінюючи результати біохімічного аналізу, чи відповідають показники крові даними, отриманим при клінічному дослідженні пацієнта. Це неправильний діагностичний шлях, оскільки висновки на підставі такого порівняння повністю залежать від кваліфікації лікаря-клініциста. Необхідно дотримуватися тактики комплексної постановки діагнозу, згідно з якою важливо враховувати результати широкого спектру досліджень - клінічного (огляд, аускультація і т. Д.), Інструментального (ультразвукового, рентгенологічного та т. Д.), Лабораторного (клінічний і біохімічний аналізи крові, клінічний аналіз сечі), а також даних анамнезу.

Підсумовуючи досвід колег і свій власний, можна сказати, що при оцінці результатів біохімічного аналізу важливо враховувати цілий ряд факторів: 1) референсні значення, прийняті в лабораторії; єдині коефіцієнти перерахунку (див. додаток); 2) особливості пацієнта - фізіологічні (вік, стать, порода, стадія статевого циклу) і поведінкові (в момент взяття крові та ін.); 3) потенційний вплив терапевтичних препаратів та інших факторів на показники крові; 4) особливості транспортування зразка крові (чи дотримувалися правила), дата / час взяття зразка, проведення дослідження; 5) позначки в бланку результатів про наявність у зразку крові відхилень, здатних спотворити результат аналізу (гемоліз, гіперліпідемія та ін.); 6) особливості методик і обладнання, на якому виконано дослідження; 7) регулярний зовнішній контроль якості роботи обладнання і дотримання внутрішнього регламенту лабораторії, репутація в професійному середовищі; 8) можливість звернення в лабораторію, яка надала результати досліджень, за консультацією фахівця про можливі причини змін показників крові. Потрібно враховувати і той факт, що в завдання лікаря-лаборанта входить опис показників крові, але не постановка діагнозу, це є прерогативою лікаря-клініциста.

Референсні значення, прийняті в лабораторії, єдині коефіцієнти перерахунку

Референсні значення всіх показників кожна лабораторія визначає з урахуванням наявного обладнання, використовуваних методик і відповідних калібрувальних і контрольних матеріалів, а також довідкових даних по всіх параметрах крові і результатів контрольних досліджень крові здорових тварин, проведених для апробації кожного виду аналізу. Існують міжнародні одиниці (СІ) для ха-рактеристики параметрів крові (ГОСТ 8.417-2002), прийняті Міжнародної Метричної Конвенції. Результати досліджень, призначені для оцінки лікарями-клініцистами, надійні лабораторії надають в одиницях, порівнянних з даними інших лабораторій або призводять перерахункові коефіцієнти.

Фізіологічні фактори, що впливають на біохімічні показники крові

До цих факторів відносять вікові, статеві та породні особливості. Найсуттєвіші відмінності в нормальних значеннях показників пов'язані з віком тварин. Відхилення від средневідовой норми (прийнятої в літературі) у молодих і старих тварин можуть становити 25 ... 100% і більше.

Мал. 1. Динаміка зміни біохімічних показників в крові молодих тварин.

Найбільш значущі відмінності у фізіологічних параметрах крові виявляють при порівнянні молодих і дорослих тварин.

Зміни нормальних значень біохімічних показників крові, асоційовані з віком і статтю, обумовлені відмінностями в активності обмінних процесів, в гормональному фоні, функціональної зрілості організму.

Вік. У молодих тварин в порівнянні з дорослими через відносно невисокою ферментативної активності печінки, більш високий вміст плазми на одиницю об'єму крові, прискореного синтезу білка знижені значення багатьох параметрів білкового і ферментативного обмінів (рис. 1): АЛТ, АСТ, фібриноген, загальний білок , альбумін, амілаза. Знижений вміст сечовини зумовлена ​​поєднанням прискореного анаболізму білка і вікової полидипсии і поліурії. Концентрація креатиніну знижена внаслідок малої маси тіла [23]. Будь-яке збільшення вмісту сечовини і креатиніну в сироватці слід розглядати в співвідношенні з питомою вагою сечі [13]. Низька концентрація холестерину в крові тварин у віці до 6 міс. обумовлена ​​високою швидкістю його витрачання, що викликано прискореним ростом тканин, статевим розвитком і синтезом стероїдних гормонів.

У молодих собак (у кішок в меншій мірі) підвищено (щодо средневідових норм) значення показників мінерального обміну - концентрація кальцію і фосфору (внаслідок активного росту скелета і високої активності гормону росту). Активність ЛФ і ГГТ у цуценят до 10-денного віку вище, ніж у дорослих в 20 ... 25 раз (можуть досягати 8760 U / L і 3558 U / L відповідно). Активність даних ферментів зростає протягом 24 годин після народження і відображає інтенсивність поглинання молозива, багатого ферментами, в той же час тканинні фактори в молозиві можуть стимулювати ендогенний синтез ЛФ і ГГТ. Тому в перші дні життя дані показники не можна використовувати в діагностиці розладів гепатобіліарної системи. ЛФ і ГГТ можуть служити критерієм споживання цуценятами молозива. Починаючи з 2-х тижневого віку цуценя активність ЛФ і ГГТ в сироватці крові знижується до 176 ... 541 U / L і4 ... 77 U / L, відповідно, і в віці 4-х тижнів до-ходить до 135 ... 201 U / L і 2 ... 7 U / L, відповідно [5].

Значення ЛФ можуть перевищувати норму в 2 ... 2,5 рази в період активного росту, особливо у собак великих порід, за рахунок високої активності кісткового ізоферменту. У кошенят в сироватці крові збільшення активності ЛФ і ГГТ, на відміну від цуценят, після прийому молозива не спостерігають.

Вищими у молодих тварин, внаслідок зростання синтезу імуноглобулінів, бувають показники, пов'язані з імунним статусом (глобуліни, лімфоцити).

У взятої натщесерце крові рівень жовчних кислот у цуценят і кошенят у віці 2-х міс. не має істотних відмінностей від дорослих тварин. Однак у взятій натщесерце крові і сироватці після прийому їжі відзначена гипераммониемия (до 365 і 568 μmol / L відповідно) у здорових щенят ірландського вовкодава від 6-тижневого віку з нормалізацією концентрації аміаку в 3 ... 4-місячному віці [13]. Діапазон фізіологічних концентрацій натрію, калію, хлору у молодих собак і кішок відповідає нормам для дорослих тварин [9].

Пол і порода. Традиційно різні умови утримання і годівлі тварин, виведення порід в різних географічних місцевостях накладають відбиток на метаболічні процеси в організмі і навіть визначають схильність до деяких захворювань на генетичному рівні. У самок нижче концентрація холестерину, а також активність більшості ферментів (АлАТ, КФК), але вищий вміст фосфору і жовчних кислот [4].

Існування породної варіабельності у кішок підтверджені багатьма дослідниками і наглядом лікарів-клініцистів. Виявлено породна схильність до певних захворювань (наприклад, кішки бірманської породи частіше хворіють вірусних інфекційних перитонітом або на цукровий діабет) [14, 17, 20, 21]. Достовірно доведено, що у бірманських кішок більш широкий референсний інтервал креатиніну [10]. При дослідженні у кішок різних порід вмісту глюкози, сечовини, креатиніну, протеїну, альбуміну, кальцію, фосфору, натрію, калію, хлору, активності АлАТ, ЩФ найбільш значущі відмінності були виявлені в змісті креатиніну, глюкози, загального білка у кішок таких порід, як бірманська, шартрез, мейнкун і перська. У здорових кішок даних порід середні значення показників можна було порівняти з референсними, а верхня межа показників збільшені на 20 ... 25% [10, 12, 15].

Породні відмінності у собак більш виражені, ніж у кішок, що пояснюється великими коливаннями в масі тіла (від чихуахуа до ірландського вовкодава), умовами утримання (кімнатні собачки, гончаки, мисливські, сторожові і т. Д.). При дослідженні стерилізованих собак середнього віку (маламут, хас-ки, голден ретривер, англійський сетер) відзначено, що середні значення показників приблизно однакові, зате значення верхньої і нижньої межі істотно розрізняються (розкид):

• креатинін: маламут і голден ретривер - до133 μmol / L, референсні значення у всіх досліджуваних порід - 88 ... 106 μmol / L;

• сечовина: англійський сетер - до 11,4 mmol / L, середнє значення по всіх породах - 2,9 ... 8,9 mmol / L [6];

• магній: голден ретривер - нижня межа 0,58 mmol / L, середнє значення 0,62 ... 0,9 mmol / L;

• глобулін: маламут - до 45 g / l, референсні значення 24 ... 38 g / l;

• ЛФ: хаскі - до 203 U / L, сетер - до 117 U / L, референсні значення 10 ... 92 U / L. За даними зарубіжних колег, ці породи схильні до гепатопатію холестазу [18]; завищені значення ЛФ можуть бути пов'язані з атиповим адренокортіцізмом, до якого схильні собаки породи сетер [24];

• ГГТ: сетер - до 11,0 U / L, норма 1 ... 6 U / L;

• глюкоза: хаскі - до 7,2 mmol / L, середнє значення 4,2 ... 6,4 mmol / L;

• холестерин: маламут - до 9,38 mmol / L, сетер -до8,73, середні значення 3,55 ... 8,75 mmol / L;

• амілаза: ретривер - до 1158 U / L, сетер-до 1293, середні значення 162 ... 974 U / L.

Існують дані щодо збільшення активності АлАТ, АсАТ і ГГТ у гончих з віком і в залежності від фізичного навантаження [16].

У собак породи бернський зіненхунд при порівнянні 21 біохімічного показника від прийнятих референсних значень відрізнялися ЛФ - до 464 U / L, референсні до 174 U / L, амілаза - 285 ... 1255 U / L, референсні 186 ... 798 U / L; холестерин - 5,29 ... 10,08 mmol / L, референсні 3,5 ... 6,99 mmol / L [11]. Треба відзначити, що більш висока активність амілази без відповідного підвищення активності ліпази малоинформативна, а більш висока концентрація холестерину може бути витлумачена як схильність до нефропатії. Крім того, собаки породи зінненхунд схильні до злокачествен-ному гистиоцитозу, протягом якого негативно впливає на печінку, про це може свідчити і підвищення активності ЛФ [22].

У собак породи хорт значно вище значення креатиніну (до 186 μmol / L) і КФК, причому підвищення значень цих показників знаходяться в прямій залежності від фізичного навантаження [8]. Активність печінкових ферментів - АлАТ, АсАТ, ЛФ у них також значно вище, ніж референсні значення для собак в цілому, збільшено рСО2 без явних ознак алкалоза. У активно працюють собак знижені показники кальцію, фосфору, тіреодних гормонів (Т4 і Т4 вільний), але підвищена концентрація глюкози в порівнянні з референсними значеннями [16].

Найкращий спосіб виявити відхилення від фізіологічних норм у кожного конкретного тваринного - це оцінювати параметри крові в динаміці (при регулярному диспансерному дослідженні, починаючи з молодого віку).

Відмінності результатів біохімічного аналізу в залежності від обладнання

До 70% помилок, що спотворюють результати досліджень, пов'язані з преаналітичного етапу (табл. 1). Присутність в сироватці сторонніх часток спотворює результати фотометрії, т. К. Метаболіти зруйнованих клітин, пігменти, великомолекулярних з'єднання можуть вступати в реакцію з обумовленою речовиною або компонентами робочого реактиву, впливати на активність ферментів [1, 25].

Таблиця 1. Похибки преаналітичного етапу.

фактор впливу

Можливі похибки при аналізі

Прийом їжі менш ніж за 8 год до взяття крові

Ліпемія (хілез)

Струшування крові в процесі взяття, при зберіганні, транспортуванні

гемоліз

Прийом лікарських препаратів (доза, тривалість застосування, індивідуальна чутливість)

Зміна фізіологічних параметрів

Хілез - помутніння сироватки / плазми крові, обумовлене вмістом в ній великої кількості жирів; веде до завищення значень печінкових трансфераз; глюкози, білірубіну, холестерину, тригліцеридів, жовчних кислот, амілази та ін .; до заниження значень натрію, хлору, ГГТ.

Гемоліз - надлишковий вихід гемоглобіну в сироватку крові внаслідок руйнування еритроцитів; веде до завищення значень білірубіну, КФК, альбуміну, протеїну, АлАТ; до заниження показників ЛФ, жовчних кислот, амілази, ГГТ і т.д.

Прийом лікарських препаратів може супроводжуватися зміною перебігу патологічних процесів і зрушеннями певних показників, щодо фізіологічної норми. Наприклад: сульфаніламіди призводять до підвищення концентрації білірубіну, преднізолон - глюкози; фенобарбітал - збільшення активності печінкових транфераз; цефалоспорини обумовлюють позитивну реакцію на глюкозу в сечі [2].

Нагадаємо, що білірубінемія - підвищений вміст білірубіну в крові, відображає патологічні процеси, що відбуваються в організмі, що супроводжуються значним руйнуванням функціональних елементів печінки (гепатоцитів), збільшенням активності печінкових трансфераз, вмісту пігментів печінки і зниженням кількості синтезованих в печінці речовин (альбуміну, холестерину і ін .). Підвищений вміст білірубіну в крові характеризує патологічні процеси, що відбуваються в організмі, а не помилки преаналітичного етапу.

Автоматичне обладнання для біохімічного аналізу

Існує кілька типів біохімічних аналізаторів, принципово різняться по застосовуваних методик. Залежно від використовуваних реагентів розрізняють біохімічні аналізатори на рідких реагентах, або «рідка хімія», і використовують «суху» хімію, які в свою чергу поділяються на «суху» стриповий і «суху» слайдовую. Кожен з цих типів має свої особливості, переважно стосуються технічних аспектів встановлених методик, оцінки отриманих результатів, можливих похибок під дією різних зовнішніх факторів.

Мал. 2. Принцип трансмісійної спектроскопії, що використовується в «рідинних» анализаторах.

Аналізатори, засновані на використанні сухих реагентів в якості «стрипов», малоцікаві для біохімічного аналізу крові. Їх недоліки: висока похибка результатів, велика кількість факторів, здатних вплинути на результат, неможливість гідного контролю якості і низька порівнянність результатів. Прикладом можуть служити аналізатори для клінічного дослідження сечі і портативні глюкометри.

Аналізаторі, Які Використовують рідкі реагенти, широко пошірені в медицині людини й Досить давно застосовуються у ветерінарній медицині. Аналізаторамі цього типу оснащені Великі лабораторії и науково-дослідні центри. Принцип роботи більшості фотометров и біохімічніх аналізаторів «рідкої» хімії Заснований на турбідіметрічнім методі (вімірює інтенсівність світла, что пройшло через аналізовану суспензію). Основні похібкі, супутні ЦІМ методом (за умови якісної Калібрування) могут буті пов'язані з частково відображенням світла від поверхонь кювети. Статистично доведена похібка - Зменшення значень около 9,2%, что враховують в методиках [1]. Багаторазове использование кювет и роторів обумовлює похібка при дослідженні мінерального складу Сироватко крови (за рахунок домішок води). До збільшення значень щільності досліджуваного розчину (сироватки, сечі) призводять і різні домішки органічного і неорганічного походження (зруйновані клітини, білки, жири, частинки шерсті і пилу), які зменшують інтенсивність реєстрованого фотодиодом проходить світла, а при перерахунку збільшують значення визначається параметра (рис . 2).

Аналізатори «сухий» хімії набувають все більшого поширення і в медицині і в ветеринарії, що обумовлено винаходом і впровадженням слайдовий технології, що дозволяє мінімізувати артефакти (хілез, залишки зруйнованих клітин, забруднення проби микрочастицам пилу і т. Д.). Слайдовая технологія біохімічного аналізу сироватки крові незамінна в умовах невеликих клінік і ветеринарних кабінетів, при виникненні екстрених станів, коли немає можливості або часу доставити проби в лабораторію, а результати потрібні терміново.

Мал. 3. Принцип рефлектометричним (відбивної) спектроскопії стриповий (а) і слайдовий (б) технологій.

Принцип слайдовий технології заснований на вимірюванні і оцінці відбитого (а не проходить, як в «рідинних» анализаторах) світла. Технологія слайда передбачає кілька шарів, через які проходить досліджуваний зразок. Після розподілу зразка на першому шарі, на другому відбувається фільтрація великомолекулярних з'єднань. Таким чином, на реакційний шар потрапляють тільки компоненти з малою молекулярною масою. Третій шар - індикаційний (реакційний), де відбувається реакція і з якого зчитуються дані по зміні забарвлення і оптичної щільності, виключаючи, таким чином, вплив багатьох артефактів (рис. 3, 4). Виміряна оптична щільність перетворюється в значення концентрації на основі калібрувальної кривої, наявної в пам'яті аналізатора.

Мал. 4. Розташування шарів слайда.

Для практикуючого ветеринарного лікаря можуть бути цікаві деякі принципові відмінності аналізаторів, що використовують для досліджень «суху» і «рідку» хімію (табл. 2).

Таблиця 2. Порівняльні параметри аналізаторів «сухий» і «рідкої» хімії.

Аналізатори на «рідкої» хімії

Аналізатори на «сухий» хімії

Володіють достатньою точністю при дотриманні суворого внутрішньо- і міжлабораторного контролю якості

Володіють високою точністю за рахунок заводського калібрування і підготовки реагентів, що виключає «людський фактор»

Широка доступність калібрувальних і контрольних матеріалів

Більш широкі межі лінійності * вимірювання, ніж в рідинних анализаторах

Лабільність в зберіганні реагентів

Суворі обмеження в зберіганні реагентів

Низька вартість реагентів (собівартість аналізу)

Висока вартість витратних матеріалів (собівартість аналізу)

При значеннях, що перевищують лінійність методу *, похибка дослідження зростає за рахунок ручного розведення зразка

При багаторазовому використанні кювет і роторів може збільшитися похибка вимірювання мінерального складу сироватки крові за рахунок домішок води

Технологія «слайда» дозволяє виключити похибки вимірювання оптичної щільності, пов'язані з забрудненням проби сторонніми великомолекулярних частинками і жировими краплями

Неможливо виключити артефіціальное зміна параметрів дослідження при гемолізі і гіпербілірубінемії

Можна досліджувати будь-які прозорі і напівпрозорі середовища (сироватка крові, плазма, сеча, випотние рідини)

Можна досліджувати сироватку крові, сечу, цільну кров

* Лінійність методу - інтервали значень показника, при яких виробник реагентів гарантує достовірний результат. Ряд біохімічних показників має значні відмінності лінійності в залежності від встановлених на аналізаторі методик. Так, лінійність методу підрахунку концентрації глюкози Human до 22,9 ммоль / л, Idexx до 38,1 ммоль / л; ЛФ Human до 700 U / L, Idexx до 2000 U / L.

Якщо лікар отримує результат, що виходить за межі лінійності встановленої методики, треба мати на увазі, що при підрахунку цього показника сироватка була розлучена і, отже, похибка вимірювання збільшилася.

Ми постаралися висвітлити деякі аспекти біохімічного аналізу крові, здатні впливати на одержуваний результат. Для контролю результатів некоректно дублювати аналіз в іншій лабораторії, особливо через кілька днів, т. К. Там можуть бути принципово інші обладнання та встановлені методики. В якості рекомендації хочеться нагадати, що уточнити «незрозумілі» можна за допомогою диференціальних (додаткових) тестів або процедур (приклад: при перевищує фізіологічні норму глюкози рекомендують дослідити фруктозамін або глікерірованний гемоглобін; при підвищенні ниркових показників - функціональні тести ниркової фільтрації: фракційної екскреції електролітів, ШКФ та інше).

Додаток. Коефіцієнти перерахунку одиниць.

показатели

коефіцієнт перерахунку
в одиниці СІ

одиниці СІ

глюкоза

mg / dl х 0,0555

mmol / L

сечовина

mg / dl х 0,166

mmol / L

креатінін

mg / dl х 88,4

μmol / L

Общ.білірубін

mg / dl х17,2

μmol / L

прямий білірубін

mg / dl х 17.2

μmol / L

Сечова к-та

mg / dl х59,3

μmol / L

Лактатдегидрогеназа (ЛДГ)

U / L

U / L

Аспартатамінотрансфераза (АСТ)

U / L

U / L

Аланінамінотрансфераза (АЛТ)

U / L

U / L

α-Амілаза

U / L

U / L

ліпаза

U / L

U / L

Креатинфосфокиназа (КФК)

U / L

U / L

Сорбідолдегідрогеназа (СДГ)

U / L

U / L

Гамма-глютамілтрансферази (ГГТ)

U / L

U / L

Лужна фосфатаза

U / L

U / L

Загальний білок

g / dl х 10

g / l

альбумін

g / dl х 10

g / l

глобулін

g / dl х 10

g / l

фібриноген

g / dl х 10

g / l

холестерин

mg / dl х0,026

mmol / L

тригліцериди

mg / dl х 0,0114

mmol / L

кальцій

mg / dl х 0,25

mmol / L

фосфор

mg / dl х 0,32

mmol / L

магній

mg / dl х 0,412

mmol / L

залізо

vg / dl х 0,179

μmol / L

калій

mmol / L

mmol / L

натрій

mmol / L

mmol / L

хлор

mg / dl х 0,282

mmol / L

Бібліографія

1. Камишніков В.С. Довідник по клініко-біохімічних досліджень і лабораторної діагностики, 3-е изд., Москва, изд. «МЕДпресс-інформ», 2009, 196с.
2. Меньшиков В.В. Критерії оцінки методик і результатів клінічних лабораторних досліджень, довідковий посібник: - Москва, изд. Лабора, 2011. - 328с.
3. Словник-довідник. - Москва, Видавництво стандартів, 1990, ISBN 5-7050-0118-5
4. Butterwick RF, McConnell M, et al. Influence of age and sex on plasma lipid and lipoprotein concentrations and associated enzyme activities in cats. Am J Vet Res 62: 331-336, 2001..
5. Center SA, Randolph JF, et al. Effect of colostrum ingestion on gamma-glutamyltransferase and alkaline phosphatase activities in neonatal pups. Am J Vet Res 52: 499-504, 1991.
6. Concordet D, Vergez F, Trumel C, et al. A multicentric retrospective study of serum / plasma urea and creatinine concentrations in dogs using univariate and multivariate decision ruled to evaluate diagnostic efficacy. Vet Clin Pathol. 2008; 37: 96-103.
7. Dunlop MM, Sanchez-Vazquez MJ, Freeman KP, Gibson G, Sacchini F, Lewis F. Determination of serum biochemistry reference intervals in a large sample of adult greyhounds. J Small Anim Pract.
8. Gunn-Moore DA, Dodkin SJ, Sparkes AH. An unexpectedly high prevalence of azotemia in Birman cats (letter). J Feline Med Surg 2002; 4: 165-166.
9. Driscoll CA, Menotti-Raymond M, Roca AL, et al. The Near Eastern origin of cat domestication. Science 2007; 27: 519-523.
10. Fettman MJ and Allen TA. Developmental aspects of fluid and electrolyte metabolism and renal function in neonates. Comp Contin Ed Pract Vet 13: 392-403, 1991.
11. Jubb KVF. The Pancreas. In: Jubb KVF, Kennedy PC, Palmer N, eds. Pathology of Domestic Animals. 1st ed. San Diego, CA: Academic Press Inc .; 1993: 407-424.
12. Harper EJ, Hackett RM, Wilkinson J, et al. Age-related variations in hematologic and plasma biochemical test results in Beagles and Labrador Retrievers. J Am Vet Med Assoc 2003; 223.
13. Hoskins JD. Veterinary Pediatrics. Dogs and Cats from Birth to Six Months (3rd ed.), WB Saunders Company, Philadelphia, 2001..
14. Lederer R, Rand JS, Jonsson NN, et al. Frequency of diabetes mellitus and breed predisposition in domestic cats in Australia. Vet J 2009 року; 179: 254-258.
15. Lipinski MJ, Froenicke L, Baysac KC, et al. The ascent of cat breeds: Genetic evaluations of breed and worldwide randombreed populations. Genomics 2008; 91: 12-21.
16. Lowseth LA, Gillett NA, Gerlach RF, Muggenburg BA. The effects of aging on hematology and serum chemistry values ​​in the beagle dog. Vet Clin Pathol. 1990; 19: 13-19.
17. McCann TM, Simpson KE, Shaw DJ, et al. Feline diabetes mellitus in the UK: The prevalence within an insured cat population and a questionnaire-based putative risk factor analysis. J Feline Med Surg 2007; 9: 288-299.
18. Nestor DD, Holan KM, Johnson CA, SchallW, Kaneene JB. Serum alkaline phosphatase activity in Scottish
19. Terriers versus dogs of other breeds. J Am Vet Med Assoc.,
20. Pesteanu-Somogyi LD, Radzai C, Pressier BM. Prevalence of feline infectious peritonitis in specific cat breeds. J Feline Med Surg 2006; 8: 1-5.
21. Whincup PH, Gilq JA, Owen CG, et al. British South Asians aged 13-16 years have higher fasting glucose and insulin levels than Europeans. Diabet Med 2005; 22: 1275-1277.
22. Reusch C, Hoerauf A, Lechner J, et al. A new familial glomerulonephropathy in Bernese mountain dogs. Vet Rec. 1994; 134: 411-415.
23. Zandvliet MMJM and Rothuizen J. Transient hyperammonemia due to urea cycle enzyme deficiency in Irish wolfhounds. J Vet Intern Med 21: 215-218, 2007.
24. Zimmerman K, Panciera D, Panciera R. Hyperalkaline phosphatemia in Scottish Terriers caused by atypical adrenal cortical disease [abstract]. Vet Clin Pathol.
2007; 36: 312.